藥物代謝動力學（Pharmacokinetic, PK）是定量研究藥物在生物體內吸收、分布、代謝和排泄規律，并運用數學原理和方法闡述血藥濃度隨時間變化規律的一門學科。

血清中血藥濃度的檢測在藥代動力學（pharmacokinetics, PK）實驗中比較常見，通過系統性檢測動物或人血清中血藥濃度來分析藥物在動物或人體內的吸收、分布、代謝和排泄（即 ADME）情況。其意義包括預測血藥水平，制定給藥方案，劑量和給藥頻度，指導合理用藥；分析藥物相互作用及濃度監測；設計新藥，改進藥物劑型，設計合理的給藥方案等。

今天小編將給大家比較三種具有代表性的血藥濃度檢測方法。

ELISA 是抗體藥血藥濃度檢測中常用的技術。下面比較三種代表性的用于治療性抗體的血藥濃度檢測方法。

檢測儀器：BMG CLARIOSTAR 酶標儀

樣本信息：Rituximab 血清樣本

主要試劑：
Human CD20 蛋白
Peroxidase AffiniPure Goat Anti-Human IgG, Fcγ Fragment Specific

簡要流程：
1. 將 human CD20 以 0.5 µg/well 的濃度包被到板上；
2. 將 rituximab 梯度稀釋到人血清中（血清終濃度 0.1%）；
3. 將稀釋過的 rituximab 加到孔板中；
4. 加入 Peroxidase AffiniPure Goat Anti-Human IgG 二抗；
5. TMB 顯色。

檢測結果：
為避免非特異背景干擾，該方法對血清樣本進行了 1000 倍稀釋。由于 CD20 蛋白和抗體的親和力較弱，因此不能準確估計基質中的抗體藥水平。

Anti-idiotypic Capture ELISA

檢測儀器：BMG CLARIOSTAR 酶標儀

樣本信息：Rituximab 血清樣本

主要試劑：
Anti-Rituximab Antibodies（ACROBiosystems, Cat. No. RIB-Y35）
Peroxidase AffiniPure Goat Anti-Human IgG, Fcγ Fragment Specific

簡要流程：
1. 將 Anti-Rituximab Antibodies（ACROBiosystems, Cat. No. RIB-Y35）以 0.05 µg/well 的濃度包被到板上；
2. 將 rituximab 梯度稀釋到人血清中（血清終濃度 0.1%）；
3. 將稀釋過的 rituximab 加到孔板中；
4. 加入 Peroxidase AffiniPure Goat Anti-Human IgG 二抗；
5. TMB 顯色。

檢測結果：
該方法血清樣本檢測范圍為 0.156～10 µg/mL，檢測靈敏度為 0.156 µg/mL

Bridging ELISA by Anti-idiotypic Antibodies

檢測儀器：BMG CLARIOSTAR 酶標儀

樣本信息：Rituximab 血清樣本

主要試劑：
Anti-Rituximab Antibodies（ACROBiosystems, Cat. No. RIB-Y37）
Biotinylated Anti-Rituximab Antibodies
Streptavidin Protein, HRP (Thermo, Cat.No. 21126)

簡要流程：
1. 將 Anti-Rituximab Antibodies（ACROBiosystems, Cat. No. RIB-Y37）以 0.2 µg/well 的濃度包被到板上；
2. 將 rituximab 梯度稀釋到人血清中（血清終濃度10%）；
3. 將稀釋過的 rituximab 加到孔板中；
4. 加入 Biotinylated Anti-Rituximab Antibodies；
5. 加入 Streptavidin Protein, HRP 二抗；
6. TMB 顯色。

檢測結果：
該方法血清樣本檢測范圍為 0.012～0.78 µg/mL，檢測靈敏度為 0.012 µg/mL。