ELISA實驗有妙招:如何巧妙保存血清標本?
ELISA實驗有妙招,如何巧妙保存血清標本?血清是較為常見的實驗室檢測樣本,對于血清保存好才是關鍵,因為血清保存直接關系到后面ELISA實驗的成功與否,下面我們跟隨古朵生物技術小編一起來看看.
如何巧妙保存血清樣本:
1.樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產生分解作用;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作標記的測定方法產生非特異性干擾。
2.血清標本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,ELISA如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應在-70℃以下。
3.冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復凍融。標本的反復凍融所產生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產生破壞作用,從而引起假陰性結果。此外,凍融標本的混勻亦應注意,不要進行劇烈振蕩,反復顛倒混勻即可。
4.要注意避免出現(xiàn)嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標記酶的測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應顯色。
5.標本在保存中如出現(xiàn)細菌污染所致的混濁或絮狀物時,應離心沉淀后取上清檢測。
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