有關(guān)細(xì)胞因子ELISA試劑盒的試驗(yàn)條件詳解

　　細(xì)胞因子ELISA試劑盒液體類標(biāo)本： 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

　　血清： 室溫血液自然凝結(jié)10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

　　血漿： 應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求挑選EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

　　尿液： 用無(wú)菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)施。

　　細(xì)胞培養(yǎng)上清： 檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管搜集。

　　ELISA試劑盒的試驗(yàn)條件如下：

　　1、固相載體的挑選：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其方式可所以凹孔平板、試管、珠粒等。

　　2、包被抗體或抗原的挑選：將抗體或抗原吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。

　　3、 酶標(biāo)記抗體作業(yè)濃度的挑選：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定。然后再固定其它條件或采取“方陣法"，在正式試驗(yàn)體系里準(zhǔn)確地滴定其作業(yè)濃度。

　　4、酶的底物及供氫體的挑選：對(duì)供氫體的挑選要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無(wú)色。

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