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抗體和重組蛋白的使用及該如何保存的方法

時(shí)間:2023-10-10閱讀:537
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  抗體和重組蛋白的使用及該如何保存的方法
 

  關(guān)于抗體和重組蛋白的使用方法和該如何保存的方法的介紹。

  不管是儲(chǔ)存還是運(yùn)輸,均應(yīng)避免凍融 。冰晶會(huì)破壞抗體和重組蛋白的空間結(jié)構(gòu),導(dǎo)致蛋白變性形成多聚體和重組蛋白構(gòu)象變化,從而降低抗體的結(jié)合 能力 ,并加速抗體和重組蛋白的降解 。

  正確地保存抗體和重組蛋白,直接影響到抗體和重組蛋白的活性使用 效果 ,如果保存得當(dāng),大多數(shù)抗體和重組蛋白的活性都能保持多年 。

  1.在接收 到抗體 和重組蛋白后操作 。

  接收 到抗體 和重組蛋白后(大部分 抗體 和重組蛋白都是 溶于 液體 ),一定要在4℃12000 rpm,離心 3分鐘 ,然后 打開 蓋子 進(jìn)行 分裝 、溶解 和保存 (若抗體 和重組蛋白體積 小于 50 ? l,請(qǐng)將離心 時(shí)間 延長(zhǎng) 到5分鐘 ,以確保 所有 的抗體 和重組蛋白都被離心 ,干粉 狀態(tài) 同樣 適用 )。 抗性 和重組蛋白采用 專門 的貯存 管,只需經(jīng)12000 rpm離心 3分鐘 ,就能將附著 在管壁 或蓋子 上的抗體 和重組蛋白全部 離心 (甚至 10000 rpm離心 也會(huì)不* 離心 ,導(dǎo)致 抗體 和重組蛋白數(shù)量 不足 )。 請(qǐng)仔細(xì)閱讀 說明 ,按照 建議 的保存 條件 正確 保存 和使用 抗體 和重組蛋白。

  2.抗體 及重組蛋白經(jīng)久 保存 。

  對(duì)大多數(shù) 抗體 和重組蛋白,較適宜 的保存 方法 為:抗體 分裝 后保存 在-20 ℃,重組蛋白分裝 后保存 在-80 ℃。

  (1)分裝 可-可大大減少重復(fù) 凍融 對(duì)抗體 和重組蛋白活性 的損害 ,同時(shí) 也降低 了從同一 管內(nèi) 多次 吸取 抗體 和重組蛋白引起 的污染 的可能性 。

  (2)分裝 量較好 在一次 試驗(yàn) 結(jié)束 后再進(jìn)行 ,少于 10 次? l每份 。 由于 重組蛋白的體積 越小,抗體 和重組蛋白的濃度 就越容易 受到 蒸發(fā) 和管壁 吸附 的影響 。

  (3)復(fù)融 后的分裝 抗體 和重組蛋白如一次 不用 ,應(yīng)將剩余 母液 保存 在4℃,避免 再次 凍結(jié) 。

  (4)抗體 及重組蛋白工作液 在配制 當(dāng)天 要用完,4℃保存 的時(shí)間 不要 超過 1天。

  (5)絕-避免 在自動(dòng) 除霜 冰箱 中保存 抗體 和重組蛋白,在冰箱 的內(nèi)層 保存 抗體 和重組蛋白,避免 溫度 變化 引起 反復(fù) 凍融 。

  3.抗體 和重組蛋白的短期 保存 。

  大多數(shù) 抗體 和重組蛋白在4℃4℃短時(shí)間 保存 1~2周,不影響 抗體 和重組蛋白的活性 。 若能盡快 使用 抗體 和重組蛋白(1~2周),建議 在4℃保存 ,以避免 反復(fù) 凍融 對(duì)抗體 和重組蛋白的活性 造成 損害 。 重點(diǎn) 是按照 說明書 推選 的方法 ,正確 保存 抗體 和重組蛋白。

  4. 抗體 和重組蛋白運(yùn)輸 條件 。

  通常 運(yùn)輸 過程 需要 1~2個(gè)星期 ,因此需要低溫 4℃條件 下。4℃ 運(yùn)輸主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體和重組蛋白活性的損害(如果使用干冰運(yùn)輸,那么收到時(shí)抗體和重組蛋白是凍起來的,為了分裝就需要解凍,這就多了一次凍融的過程),所以運(yùn)輸過程中一般避免干冰運(yùn)輸。

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