細胞活性定磷比色法定量檢測試劑盒實驗步驟

　　實驗開始前，將-20℃冰箱里的ELISA試劑盒中的試劑溶液放進冰槽里融化。然后進行下列操作。

　　一、 樣品準備

　　1. 準備好 25cm2細胞培養瓶或 60mm細胞培養皿的待測培養細胞(5 X 106細胞)

　　2. 小心加入 xx 毫升預冷的 SBJ 清理液(試劑 A)，覆蓋生長表面

　　3. 小心抽去清理液

　　4. 使用細胞刮脫棒輕柔刮脫細胞

　　5. 加入 xx 毫升 SBJ 清理液(試劑 A)，混勻細胞

　　6. 移入到預冷的 15 毫升錐形離心管(注意：懸浮細胞從這一步驟開始)

　　7. 放進 4℃臺式離心機離心 5 分鐘，速度為 300g

　　8. 小心抽去上清液

　　9. 加入 xx 微升S B J 裂解液(試劑 B)，充分混勻

　　10.轉移到預冷的 1.5 毫升離心管

　　11.強力渦旋震蕩 15 秒

　　12.置于冰槽里孵育 30 分鐘

　　13.放進 4℃微型臺式離心機離心 5 分鐘，速度為 16000g(或 13000RPM)

　　14.小心移取 500 微升上清液到新的預冷的 1.5 毫升離心管

　　15.移取 2 微升進行蛋白定量測定

　　16.即刻放進-70℃保存或置于冰槽里繼續后續操作

　　二、細胞活性定磷比色法定量檢測試劑盒測定準備

　　1. ELISA試劑盒準備好待測樣品(例如細胞裂解萃取液等)，置于冰槽里(注意：樣品須澄清)

　　2. 設定好分光光度儀(溫度為 30℃)：波長為 660nm，并置零

　　3. 準備好 5 個 1.5 毫升離心管，標記為 1 至 5 號管

　　4. 按下表分別加入S B J 陰性液(試劑 D)和 SBJ標準液(試劑 H)到每個離心管， 混勻.

　　5. 將 1 至 5 號管放進冰槽里備用，避免光照;標準管濃度見下表：

　　管號 SBJ陰性液(試劑 D) SBJ 標準液(試劑 H) 測定體系標準磷濃度

　　Elisa試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。古朵試劑盒

　　標簽：60mm細胞培養皿 上海古朵生物 試劑 標準品 1.5 毫升離心管 血漿 離心管