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抗體英文名: Cyclin D1 (WB) Antibody
靶點: Cyclin D1 (WB)
濃度: 1mg/ml
應用范圍: WB: 1:100-500
宿主: Rabbit
適應物種: Hu,Mo,Rat
標記物: 無標記(PLlabs可供應生物素、酶、熒光素標記的抗體)
克隆性: 否
保存條件: 保存于-20℃
形態: 液態
亞型: Rabbit Polyclonal IgG
免疫原: peptide corresponding to a sequence at the C-terminus of mouse Cyclin D1.
周期素D1抗體操作步驟 抗體交聯法:
⑴ 以0.3Mol/L pH 9.5硼酸鹽緩沖液將鐵蛋白稀釋成20mg/ml~25mg/ml。
⑵ 以1︰1000(W/W)的比例加入XC液室溫攪拌45min,離心去沉淀。
⑶ 以0.3Mol/L pH 9.5硼酸鹽緩沖液將提純lgG配成5mg/ml,以1︰4的比例(V/V)加入IgG與鐵蛋白-XC液,4℃攪拌48h。
⑷ 以0.1Mol/L碳酸銨溶液透析過夜,以除去多余的異氰酸鹽,再以0.05Mol/l pH 7.5 PBS透析,使pH值恢復到生理水平。
⑸ 超速離心 以1.00×105g離心5h,去上清,沉淀以0.05Mol/L PBS懸浮,再次離心,以除去未結合的IgG。
⑹ 以血清學及免疫學方法測定結合抗體的特異性、免疫活性以及標記效應,如果操作步驟嚴格,結果是滿意的。
抗體的主要功能是與抗原(包括外來的和自身的)相結合,從而有效地清除侵入機體內的微生物、寄生蟲等異物,抗體(antibody)是一種應答抗原產生的、可與抗原特異性結合的蛋白質。每種抗體與特定的抗原決定基結合。這種結合可以使抗原失活,也可能無效但有時也會對機體造成病理性損害,如抗核抗體、抗雙鏈DNA抗體、抗甲狀腺球蛋白抗體等一些自身抗體的產生,對人體可造成危害。
多抗和單抗特性比較:
(1)均一性。一種單抗中,每個抗體的化學結構和氨基酸順序都相同,只有一種Ig亞類。多抗是多種種類和亞類Ig的混合物。
(2)穩定性。單抗對PH變化敏感,對熱不穩定,提純過程中易變性,而多抗的穩定性則較好。
(3)特異性。單抗是單一地針對抗原的某一決定簇,所以用它進行血清學反應時,特異性強,敏感性高,一般不發生交叉反應。而多抗
能與抗原上的多種抗原決定簇結合,所以特異性較差,較易引起交叉反應。
(4)重復性。單抗的重復性好,而多抗每批都不一樣。
(5)沉淀反應。多抗由于與抗原多價結合容易形成網絡樣沉淀,而單抗只與抗原結合產生二聚體,不能直接形成抗原抗體沉淀物。
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