上海古朵生物供應Buffer GBT, 100 ml質粒相關溶液上海古朵生物是一家集研發、銷售為一體的高新技術生物企業，公司專注于生命科學和生物技術領域，專業提供分子生物學、免疫學、生命科學基礎研究以及臨床檢測等諸多領域的試劑、耗材、儀器等各類產品及生物技術服務。

抽提竅門
1：加溶液II（裂解液）后，操作一定要溫和，劇烈混合會導致基因組DNA污染。 [5]
2：洗脫時60℃溫育（Ellution Buffer）洗脫緩沖液或去離子水效果更好。
3：若質粒提取含量低，可增加菌液樣或換用ArtMedia Plasmid Culture，其比LB培養基質粒得量高
4：菌體應*懸浮 ， 如果沒有*懸浮菌體，則殘留的菌體團塊在溶液 II 加入后，變成難以*裂解的團塊。這個團塊在溶液 III 加入后，會有一部分蛋白質繼續存在于溶液中，成為蛋白質殘留的大根源。
5：加入溶液 II 后，混勻，體系hao能立即變得清澈。體系如果變得清澈了，馬上加入溶液 III 中和。
6：中和的操作 ，在 1.5ml 離心管中加入溶液 III 后，先顛倒兩次，使管底朝上，用指頭彈擊管底數次，再顛倒混勻。效果非常好。

Buffer GBT, 100 ml質粒相關溶液  操作步驟
Ⅰ.使用質粒提取試劑盒提取質粒時請參考具體試劑盒的操作說明。如Omega公司的E.Z.N.A.® Plasmid Mini Kit I, Q(capless) Spin [4]  （質粒提取盒）。
Ⅱ.堿裂解手提法：此方法適用于小量質粒DNA的提取，提取的質粒DNA可直接用于酶切、PCR擴增、銀染序列分析。方法如下：
1：接1%含質粒的大腸桿菌細胞于2mlLB培養基。
2：37℃振蕩培養過夜。
3：取1.5ml菌體于Ep管(離心管)，以4000rpm離心3min，棄上清液。
4：加0.lml溶液I（1%葡萄糖，50mM/LEDTApH8.0，25mM/LTris-HClpH8.0）充分混合。
5：加入0.2ml溶液II（0.2mM/LNaOH，1%SDS），輕輕翻轉混勻，置于冰浴5min.
6：加入0.15m1預冷溶液III（5mol/LKAc，pH4.8），輕輕翻轉混勻，置于冰浴5min.
7：以10，000rpm離心20min，取上清液于另一新Ep管
8：加入等體積的異戊醇，混勻后靜置10min.
9：以10，000rpm離心20min，棄上清。
10：用70%乙醇0.5ml洗滌一次，抽干所有液體。
11：待沉淀干燥后，溶于50ulTE緩沖液中（或60℃溫育去離子水）

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