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上海博湖生物科技有限公司
馬源性成分(Horse)核酸檢測試劑盒說明書中含有聚合酶鏈式反應所需要各種試劑組分,如:引物、dNTPs、緩沖液、Taq酶等,PCR反應液混合液中加入檢測樣品,即可進行PCR擴增反應。PCR擴增產物經瓊脂糖電泳染色判斷,陽性樣本將在相應大小的片段處出現特異性條帶。
產品名稱:馬源性成分(Horse)核酸檢測試劑盒說明書
規格:48T/盒
編號:BH-P4844
分類:熒光-PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。?
規格及成分:
產品名稱成 分 編 號 十孔盒包裝
MMLV 逆轉錄酶-RI 混合液 101105A 20 μL
MMLV Buffer-dNTP 混合液 101105B 60 μL
微量核酸沉淀劑 50903 400 μL
TdT(末端轉移酶) 120312 10 μL
2×TdT Buffer(含 dATP) 101105 200 μL
PCR MagicMix 3.0(含染料) 90805B 1mL×2
5′-RACE 引物 A-引物 B 混合液 yw373374 200 μL
5′-RACE 引物 C yw375 200 μL
RNase-Free 水 80403 1 mL
使用手冊 101105sc 1 份
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線。
數據采集:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器*的流程進行。本產品中所含的熒光染料在不結合DNA 時,大吸收光譜在 471nm,結合 DNA 時的大吸收光譜在 500nm,大發射光譜在 530nm。
數據處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
BTN3A3 Others Human 人 BTN3A3 人細胞裂解液 (陽性對照) 氟硅唑(標準品)質量規格:分析標準品,99.8%Flusilazole
神經前體細胞培養基NsM銳勁特(標準品)質量規格:分析標準品,≥98%Fipronil
SJCRH30[RC13;RMS 13;SJRH30]細胞,人骨髓橫紋肌肉癌細胞 人腎癌細胞系,A498細胞 人食道平滑肌細胞HESMC1酸伯安喹;1酸*質量規格:>98%,BRPrimaquine phosphate
豬靜脈血管內皮細胞;ZYM-SVEC01D-熒光素,蟲熒光素質量規格:>98.0%D-(-)-Luciferin
PCSK9 Others Human 人 PCSK9 / NARC1 人細胞裂解液 (陽性對照) 麻保沙星;馬波沙星質量規格:>98%,BRMarbofloxacin
人外殼細胞(HHorSC)( 5×105 )蒽醌Anthraquinone質量規格:AR,>98%
CL-0455TE671 subline No.2(人橫紋肌肉瘤細胞)5×106cells/瓶×21,3-二咖啡酰奎寧酸(標準品)Cynarin質量規格:HPLC≥98%,標準品
人細胞;C-33A 大鼠主動脈內皮細胞*培養基 100mL洋薊素;1,5-二咖啡酰奎寧酸(標準品)1,5-Dicaffeoylquinic acid質量規格:HPLC≥98%,標準品
b16 小鼠色素瘤細胞二氫丹參酮I(標準品)Dihydrotanshinone I質量規格:HPLC≥98%,標準品
TIE1 Others Human 人 Tie1 人細胞裂解液 (陽性對照) 二氫歐山芹醇當歸酸酯(標準品)Columbianadin質量規格:HPLC≥98%,標準品
馬源性成分(Horse)核酸檢測試劑盒說明書rRTEC, 大鼠腎小管上皮細胞醋酸*Gonadorelin Acetate質量規格:>98%,單醋酸鹽
人干細胞因子單克隆抗體細胞株;AMS2(SCF3) 人子宮頸上皮細胞*培養基 100mL*Granisetron HCl質量規格:>99.0%,BR
人結腸微血管內皮細胞HCoMEC*(標準品)Granisetron HCl質量規格:HPLC>98%,標準品
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/England/195/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 氫*Hydrochlorothiazide質量規格:度>99%,AR
KMB 人胚肺成纖維樣細胞氫*(標準品)Hydrochlorothiazide質量規格:HPLC>98%,標準品
注意事項:
①加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
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