還原酶底物 Resazurin Sodium Salt
摘要:為分析催化四聯(lián)體中關(guān)鍵氨基酸突變對(duì)黃鱔醛酮還原酶活性的影響,利用重疊PCR對(duì)黃鱔Eakr基因進(jìn)行了A81K定點(diǎn)突變,將突變基因亞克隆至p ET-28a(+)構(gòu)建了重組表達(dá)載體.重組載體轉(zhuǎn)化BL21(DE3)菌株后經(jīng)IPTG誘導(dǎo),鎳離子柱親和層析獲得了突變型蛋白(EakrA81K);以NADPH為輔酶,分析了突變型蛋白EakrA81K的底物譜,并比較了野生型(Eakr)和突變型蛋白(EakrA81K)對(duì)不同底物的還原活性;后,以甲醛為底物比較了野生型和突變型蛋白的適反應(yīng)溫度和適p H.結(jié)果表明:EakrA81K對(duì)醛類物質(zhì)以及中長(zhǎng)鏈酮類物質(zhì)具有較高的還原活性,而對(duì)醇,糖,酸類物質(zhì)沒(méi)有活性;A81K位點(diǎn)突變使得黃鱔醛酮還原酶和底物之間的親和力增加,并了酶對(duì)大部分底物的還原活性;突變稍降低了黃鱔醛酮還原酶的酸度耐受能力但了該酶的溫度耐受能力.這暗示著黃鱔醛酮還原酶Eakr的81位氨基酸在底物識(shí)別上具有重要作用.
還原酶底物 Resazurin Sodium Salt
熒光染料resorufin可用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的還原活性,已用于檢測(cè)(1,2)和線粒體代謝活性。瑞蘇林本身在還原為高紅色熒光瑞蘇芬(λEx/λEm:563/587 nm)之前是非熒光的。通常,NADPH或NADH是還原劑,在黃遞酶的存在下將瑞蘇林轉(zhuǎn)化為瑞蘇芬。因此,resazurin可用于檢測(cè)NADH、NADPH或黃遞酶水平。此外,resazurin/黃遞酶/NADPH系統(tǒng)可用于檢測(cè)產(chǎn)生NADH或NADPH的生化反應(yīng)中涉及的生化或酶活性(3-9)。盡管大多數(shù)化學(xué)品供應(yīng)商都提供瑞蘇林,但微量的瑞蘇芬污染物往往使材料不適合用于生物測(cè)定
名稱:Resazurin,Sodium Salt
形狀:暗固體
溶解性:不溶于二甲基亞砜或水
儲(chǔ)存條件:儲(chǔ)存于4°C,避光
分子式:C12H6NNaO4
分子量:251.17
【類別】:酶底物
【純度】:99%
【說(shuō)明】:可定制
【貨期】:3天
【廠家】:西安齊岳生物
【圖譜】:提供核磁,HPLC,LCMS,GC圖譜
供應(yīng)商:西安齊岳生物科技有限公司
溫馨提醒:供科研,不能用于人體實(shí)驗(yàn)
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溫馨提示:西安齊岳生物供應(yīng)產(chǎn)品用于科研,不能用于人體 zl 02.03