常有ELISA操作員反映在標本保存時出現溶血、凝集不全、受細菌污染等現象發生,ELISA試劑盒標本保存,在ELISA試劑盒試驗中是非常重要的,我公司技術員特針對相關常見問題做出總結,下面我們就來看看今日的內容:搞定ELISA試劑盒辦法我有好辦法!
一、標本凝集不全
在沒有促凝劑和抗凝劑存在的狀況下,正常血液搜集后1/2~2h初步凝聚,18~24h*凝聚。臨床查驗工作中,有時為了爭取時刻快速檢測,常在血液還未初步凝聚時即強行離心分別血清,此時的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以構成肉眼可見的纖維蛋白塊,易形成假陽性作用;這類狀況于次日復查時因血凝已*,血清中不再有纖維蛋白原存在,故復查作用變為陰性。為避免上述煩擾作用,處理的辦法是血液標本搜集后有必要使其充沛凝聚后再分別血清,或標本搜集時用帶分別膠的采血管或于采血管中加入適當的促凝劑。
二、標本管中增加物質的影響
抗凝劑、酶抑制劑及快速分別血清的分別膠等均對ELISA測定有必定煩擾作用。
?三、標本溶血
由于各種人為原因引起的標本溶血,均可因紅細胞破壞溶解時釋放出很多具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為符號的ELISA測定中,會導致非特異性顯色,ELISA試劑盒煩擾測定作用。為打敗上述煩擾作用,標本搜集時有必要留意避免溶血。
四、標本保存不妥
在冰箱中保存過久的標本,血清中IgG可聚組成多聚體、AFP可構成二聚體,在間接法ELISA測定中會導致本底過深、乃至形成假陽性;標本放置時刻過長(如一天以上),有時抗原或抗體免疫活性削弱,亦可出現假陰性。為打敗上述煩擾,ELISA測定的血清標本宜為新鮮搜集;如不能立即測定,5天內測定的血清標本可存放于4℃,1周后測定的血清標本應低溫凍存;凍存后融解的標本,蛋白質部分濃縮,分布不均,應充沛混合后再測定,但混勻時應輕柔,不行激烈振蕩。
五、標本受細菌污染
做好了ELISA試劑盒要素和操作要素之后,確保檢測作用的準確性就簡單的多了。我公司試劑盒供給全程輔導服務,為您的試驗擔任究竟!
因菌體中或許含有內源性辣根過氧化物酶,因此,被細菌污染的標本同溶血標本相同,亦可產生非特異性顯色而煩擾測定作用。歡迎您laidian咨詢我司業務員。
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