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小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒的詳細(xì)資料:
英文名稱:Mouse ubiquitin (Ub) ELISA kit
貨號(hào):KS17343
規(guī)格:96T/48T
使用范圍:科研范圍內(nèi)使用
各種種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊…
標(biāo)本齊全:血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液、關(guān)節(jié)液、胸腔yi液等…
保存條件:2-8℃
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人肌酸激酶腦型同工酶(CK-BB)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人肌酸激酶腦型同工酶(CK-BB)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒樣本處理及要求
1. 血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。
小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒需要而未提供的試劑和器材
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
4. 蒸餾水或去離子水
試劑準(zhǔn)備
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。
6. 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
9. 不能使用過期產(chǎn)品。
10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品:
KS16269 牛轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒
KS16270 牛轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)ELISA試劑盒
KS16271 牛脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)ELISA試劑盒
KS16272 牛脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒
KS16273 牛脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒
KS16274 牛著絲粒蛋白H(CENPH)ELISA試劑盒
KS16275 牛長鏈脂酰CoA脫氫酶(ACADL)ELISA試劑盒
KS16276 牛粘蛋白1(MUC1)ELISA試劑盒
KS16277 牛載脂蛋白H(APOH)ELISA試劑盒
KS16278 牛誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒
KS16279 牛游離纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒
KS16280 牛印度刺猬因子(IHH)ELISA試劑盒
KS16281 牛抑制素βE(INHβE)ELISA試劑盒
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KS16283 牛乙酰輔酶A羧化酶合成酶(ACC)ELISA試劑盒
KS16284 牛乙酰輔酶A(acetylCoA)ELISA試劑盒
KS16285 牛胰高血糖素樣肽1(GLP1)ELISA試劑盒
KS16286 牛胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7(IGFBP7)ELISA試劑盒
KS16287 牛胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)ELISA試劑盒
KS16288 牛胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP5)ELISA試劑盒
KS16289 牛胰島素(Insulin)ELISA試劑盒
KS16290 牛胰島素(INS)ELISA試劑盒
KS16291 牛一氧化氮(NO)ELISA試劑盒
KS16292 牛葉酸(FA)ELISA試劑盒
KS16293 牛亞硫酸鹽氧化酶(SUOX)ELISA試劑盒
KS16294 牛亞硫酸鹽氧化酶(sulfiteoxidase,SO)ELISA試劑盒
KS16295 牛血小板因子4(PF4)ELISA試劑盒
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KS16297 牛血小板激活因子(PAF)ELISA試劑盒
KS16298 牛血小板活化因子乙酰水解酶(PLA2G7)ELISA試劑盒
KS16299 牛血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP1)ELISA試劑盒
KS16300 牛血小板反應(yīng)蛋白(THBS1)ELISA試劑盒
KS16301 牛血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒
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