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上海科順生物科技有限公司
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大鼠前列腺素ELISA試劑盒

參  考  價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號KS15548

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

更新時間:2021-04-15 10:34:28瀏覽次數(shù):126次

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【大鼠前列腺素ELISA試劑盒】
產(chǎn)品主要應(yīng)用于分子生物學(xué)、酶聯(lián)免疫學(xué)等等。我司本著“科技,爭創(chuàng)yi流,精益求精"的經(jīng)營理念致力于為廣大高校、科研院所和企事業(yè)單位提供yi流的科研試劑和完善的技術(shù)服務(wù),滿足生物化學(xué)、分子生物學(xué) 、細胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生物科技實驗需求。

大鼠前列腺素ELISA試劑盒
英文簡稱:Rat prostaglandin ELISA kit

產(chǎn)品貨號:KS15548
品牌名稱:科順生物 
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
運輸方式:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
產(chǎn)品價格:*,歡迎在線留言洽談!
使用范圍:僅供科研檢測,不得用于臨床.

大鼠前列腺素ELISA試劑盒實驗原理:

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠胰島素(INS)水平。用純化的小鼠胰島素(INS)捕獲抗體包被微孔板,制成固相體,往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素(INS),再與HRP標記的檢測抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品小鼠胰島素(INS)含量

大鼠前列腺素ELISA試劑盒試劑盒組成

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1份

1份

 

封板膜

2片

2片

 

密封袋

1個

1個

 

酶標包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

標準品

0.3ml×6管

0.3ml×6管

2-8℃保存

酶標試劑

5 ml×1瓶

10 ml×1瓶

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑A液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑B液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

終止液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

20×濃縮洗滌液

15ml×1瓶

25ml×1瓶

2-8℃保存

注:標準品濃度依次為:40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.

大鼠前列腺素ELISA試劑盒樣本處理及要求

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

 

大鼠前列腺素ELISA試劑盒操作步驟

  • 標準品的加樣:設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
  • 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻
  • 加酶:每孔加入酶標試劑100μl,空白孔除外
  • 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘
  • 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
  • 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
  • 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
  • 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)
  • 測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值) 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

 

大鼠前列腺素ELISA試劑盒注意事項:

  • 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
  • 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
  • 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間zuei好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
  • 請每次測定的同時做標準曲線,zuei好做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
  • 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  • 底物請避光保存。
  • 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
  • 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
  • 本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

計算

以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,    

在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD      

值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋      

倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標      

準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值      

代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋      

倍數(shù),即為樣品的實際濃度。                  

 

           (此圖僅供參考)

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