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魚肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒

參  考  價面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號KS17622

品       牌

廠商性質生產商

所  在  地上海

更新時間:2021-04-15 10:35:52瀏覽次數:148次

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【魚肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒】
我司ELISA試劑盒出庫前都經過專業人員質檢,是一款收獲眾多好評與信賴的產品。實驗中只要嚴格按照產品說明書操作的,保質期內出現任何問題,公司都承諾包退包換。一次購買全程服務,公司長期為新老客戶提供免費代測,技shu支持等*服務。歡迎在線咨詢留言!

魚肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒

英文簡稱:Fish hepatocyte growth factor (HGF) ELISA kit

產品貨號:KS17622

品牌名稱:科順生物 

產品規格:96T/48T

運輸方式:快遞(根據客戶要求,選擇具體的運輸方式)

產品價格:*,歡迎在線留言洽談!

使用范圍:僅供科研檢測,不得用于臨床.

魚肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒實驗原理:

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠胰島素(INS)水平。用純化的小鼠胰島素(INS)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素(INS),再與HRP標記的檢測抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素(INS)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠胰島素(INS)含量。

魚肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒組成:

試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存

說明書 1份 1份

封板膜 2片 2片

密封袋 1個 1個

酶標包被板 1×48 1×96 2-8℃保存

標準品 0.3ml×6管 0.3ml×6管 2-8℃保存

酶標試劑 5 ml×1瓶 10 ml×1瓶 2-8℃保存

樣品稀釋液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

顯色劑A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

顯色劑B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

終止液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

20×濃縮洗滌液 15ml×1瓶 25ml×1瓶 2-8℃保存

注:標準品濃度依次為:40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.

魚肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒樣本處理及要求:

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。

2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

 

魚肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒操作步驟

1.標準品的加樣:設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;。

2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3.加酶:每孔加入酶標試劑100μl,空白孔除外。

4.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。

5.配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。

6.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

7.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 

8.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

9.測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

 

魚肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒注意事項:

1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間zuei好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

4.請每次測定的同時做標準曲線,zuei好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

計算:

以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,    

在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD      

值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋      

倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標      

準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值      

代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋      

倍數,即為樣品的實際濃度。                  

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