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規格 | 50T/100T | 儀器 | 分光光光度計/酶標儀 |
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運輸 | 常溫 | 保質期 | 三個月 |
品牌 | 合肥萊爾生物科技有限公司 | 訂購方式 | 聯系客服 |
保存 | 按說明書 | 貨期 | 現貨 |
測定意義:
S-CL主要來源于土壤微生物,S-CL催化農作物秸稈產生的葡萄糖是主要的碳源營養物質。
測定原理:
本產品采用3.5-二硝基水楊酸法測定S-CL催化纖維素降解產生的還原糖的含量。
自備實驗用品及儀器:
酶標儀/可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、96 孔板/微量石英比色皿、甲苯、硫酸(不允許快遞)和蒸餾水。
土壤纖維素酶(S-CL)檢測試劑盒試劑組成和配制:
試劑一:甲苯2.5mL×1 瓶,4℃保存;(自備) 試劑二:液體5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑三:液體20mL×1 瓶,4℃保存; 試劑四:液體5mL×1 瓶,4℃保存;
操作步驟:
1、 分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長至550nm,蒸餾水調零。
2、 加樣表(在EP管中依次加入下列試劑)
| 對照管 | 測定管 |
風干土樣(g) | 0.05 | 0.05 |
試劑一(μL) | 25 | 25 |
| 煮沸15min(蓋緊) | 振蕩混勻,室溫放置15min |
試劑二(μL ) | 45 | 45 |
試劑三(μL ) | 185 | 185 |
蒸餾水(μL ) | 45 | 45 |
振蕩混勻,40℃水浴糖化1h 后,煮沸15min(蓋緊,防止水分散失),得糖化液 | ||
糖化液(μL) | 15 | 15 |
試劑四(μL) | 35 | 35 |
混勻, 沸水浴中煮沸顯色15min(蓋緊,防止水分散失),冷卻 | ||
蒸餾水(μL) | 250 | 250 |
混勻,冷卻后,取200μL至微量石英比色皿或96孔板中, 測定550nm下吸光值A,計算ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管設定一個對照管。 |
土壤纖維素酶(S-CL)檢測試劑盒活力計算:
1、用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為 y = 0.3356x - 0.012;x 為標準品濃度(mg/mL),y 為吸光值。
單位的定義:每天每g 土樣中產生 1mg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。
S-CL 活力(U/g)=(ΔA+0.012) ÷0.3356×V 反總÷W÷T =4 29×(ΔA+0.012)
T:反應時間,1h=1/24d; V 反總:反應體系總體積:0.3mL;W:樣本質量,0.05g。
2、用 96 孔板測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為 y = 0.1678x - 0.012;x 為標準品濃度(mg/mL),y 為吸光值。
單位的定義:每天每g 土樣中產生 1mg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。
S-CL 活力(U/g)=(ΔA+0.012) ÷0.1678×V 反總÷W÷T =858×(ΔA+0.012)
土壤纖維素酶(S-CL)檢測試劑盒T:反應時間,1h=1/24d; V 反總:反應體系總體積:0.3mL;W:樣本質量,0.05g。
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