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規格 | 50T/100T | 儀器 | 分光光光度計/酶標儀 |
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運輸 | 常溫 | 保質期 | 三個月 |
品牌 | 合肥萊爾生物科技有限公司 | 訂購方式 | 聯系客服 |
保存 | 按說明書 | 貨期 | 現貨 |
土壤過氧化物酶(S-POD)檢測試劑盒說明書
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
S-POD 主要來源于土壤微生物,能夠氧化土壤有機物質產生過氧化物,在腐殖質的形成過程中具有重要作用。
測定原理:
S-POD 催化有機物質氧化成醌,后者在 430nm 有特征光吸收。
自備實驗用品及儀器:
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、yi醚 50mL(不允許快遞)和蒸餾水。
土壤過氧化物酶(S-POD)檢測試劑盒試劑組成和配制:
試劑一:粉劑×1 瓶,臨用前加入 10mL 蒸餾水,用不完的試劑仍 4℃保存; 試劑二:液體 2mL×1 瓶,4℃保存;
試劑三:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:yi醚 50mL×1 瓶,4℃保存;(自備)
樣品處理:
新鮮土樣自然風干或 37 度烘箱風干,過 30~50 目篩。
測定步驟:
1、分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上,調節波長至 430nm,蒸餾水調零。
2、加樣表
試劑名稱 | 測定管 |
風干土樣(g) | 0.02 |
試劑一(μ L) | 100 |
試劑二(μ L) | 20 |
振蕩混勻,30℃恒溫培養 1 h
試劑三(μ L) | 50 |
試劑四(μ L) | 430 |
土壤過氧化物酶(S-POD)檢測試劑盒振蕩數次,25℃室溫靜置 30min,吸取 200μ L 上層液于 430nm 處測定吸光值A
(注意:1、因yi醚粘度小,易掉液,吸取前需先將槍頭在上層液里潤洗 2~3 次,再轉移測定; 2、yi醚易揮發,轉移到 96 孔板后立即測定,最好一個一個測定)。
S-POD 活力計算:
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為y = 8.97x -0.003;x 為標準品濃度(mg/mL),y 為吸光值A。單位的定義:每天每g 土樣中產生 1mg 紫色沒食子素定義為一個酶活力單位。
S-POD 活力(mg/d/g 土樣)=(A+0.003) ÷8.97×V 反總÷W÷T=80×(A+0.003)
T:反應時間,1h=1/24d; V 反總:反應體系總體積 0.6mL;W:樣本質量,0.02g。
b. 用 96 孔板測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為y = 4.485x -0.003;x 為標準品濃度(mg/mL),y 為吸光值A。單位的定義:每天每g 土樣中產生 1mg 紫色沒食子素定義為一個酶活力單位。
S-POD 活力(mg/d/g 土樣)=(A+0.003) ÷4.485×V 反總÷W÷T=160×(A+0.003)
土壤過氧化物酶(S-POD)檢測試劑盒T:反應時間,1h=1/24d; V 反總:反應體系總體積 0.6mL;W:樣本質量,0.02g
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