土壤過氧化氫酶（S-CAT）檢測試劑盒說注意：正式測定前務必取2-3 個預期差異較大的樣本做預測定

貨號：YX-W-B937

規格：100T/48S

產品內容：

試劑一：液體×1 瓶，4℃保存；臨用前加入29.7mL 蒸餾水充分溶解后待用；用不完的試劑4℃ 保存；

試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入1mL 蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；

試劑三：液體×1 瓶，4℃保存。

土壤過氧化氫酶（S-CAT）檢測試劑盒產品說明：

S-CAT 是土壤微生物代謝的重要酶類，在H2O2 清除系統中具有重要作用。

H2O2 在240nm 下有特征吸收峰，通過測定與土壤反應后溶液在此波長下吸光度的變化，即可反應S-CAT 活性的高低。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板（UV 板）和蒸餾水

操作步驟：

一、 樣品處理：

新鮮土樣自然風干或 37  度烘箱風干，過 30~50 目篩。

二、 測定步驟：

1、 分光光度計或酶標儀預熱30min 以上，調節波長至240nm，蒸餾水調零。

2、 加樣表

土壤過氧化氫酶（S-CAT）檢測試劑盒混勻，取200uL 至微量石英比色皿或96  孔板中，240nm  處記錄各管吸光值A。

注意：每個測定管要設一個無基質管，無土管只要做一管。

三、 S-CAT 活性計算：

A、用微量石英比色皿測定的計算公式如下

單位的定義：每天每g 風干土樣催化1μmol H2O2 降解定義為一個酶活力單位。

計算公式：S-CAT（μmol/d/g）＝[(A 無土管-A 測定管+A 無基質管)×V 反總÷（ε×d）

×106]÷W÷T=16.5×（A 無土管-A 測定管+A 無基質管）

V 反總：反應體系總體積，3×10-4 L；ε：過氧化氫摩爾消光系數，4.36×104 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm； T：反應時間，20 min=1/72d； W：樣本質量，0.03g。

B、用96 孔板測定的計算公式如下

單位的定義：每天每g 風干土樣催化1μmol H2O2 降解定義為一個酶活力單位。

土壤過氧化氫酶（S-CAT）檢測試劑盒計算公式：S-CAT（μmol/d/g）＝[(A 無土管-A 測定管+A 無基質管)×V 反總÷（ε×d）

×106]÷W÷T=33×（A 無土管－A 測定管+A 無基質管）

V 反總：反應體系總體積，3×10-4 L；ε：過氧化氫摩爾消光系數，4.36×104 L / mol /cm；d：96

孔板光徑，0.5cm； T：反應時間，20 min=1/72d； W：樣品質量，0.03g