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規格 | 50T/100T | 儀器 | 分光光光度計/酶標儀 |
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運輸 | 常溫 | 保質期 | 三個月 |
品牌 | 合肥萊爾生物科技有限公司 | 訂購方式 | 聯系客服 |
保存 | 按說明書 | 貨期 | 現貨 |
土壤錳過氧化物酶(S-Mnp)檢測試劑盒注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
錳過氧化物酶(EC1.11.1.13)是一種含亞鐵血紅素的過氧化物酶,主要存在于擔子菌中, 屬于木質素降解酶系,能有效的降解木質素及廢水和土壤中比較難降解的氯化物,疊氮化合物、DTT,多環芳烴等。
測定原理:
錳過氧化物酶在 Mn2+存在的條件下,將愈創木酚氧化為四鄰甲氧基連酚,在 465nm 有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器:
天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、震蕩儀、甲苯。
土壤錳過氧化物酶(S-Mnp)檢測試劑盒試劑組成和配制:
試劑一:液體 12mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體 2mL×1 支,4℃保存。
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃避光保存。試劑四:液體 2mL×1 支,4℃保存。
樣品處理:
新鮮土樣風干,過 30-50 目篩。
測定操作:
| 對照管 | 測定管 |
土樣(mg) | 40 | 40 |
甲苯(μ L) | 30 | 30 |
25℃,靜置 15min | ||
試劑一(μ L) | 140 | 120 |
試劑二(μ L) |
| 20 |
試劑三(μ L) | 40 | 40 |
試劑四(μ L) | 20 | 20 |
充分混勻,于 30℃震蕩反應 3h,于 10000rpm,4℃離心 10min,取 150μ L 于微量石英比色皿/96 孔板,測定 465nm 處吸光值,記為A 對照管和A 測定管,△A=A 測定管- A 對照管 |
土壤錳過氧化物酶(S-Mnp)檢測試劑盒酶活計算公式:
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
酶活性定義:每克土壤每天氧化 1nmol 愈創木酚所需的酶量為一個酶活力單位。
S-MnP 活性(nmol/d /g 土樣)=
DA
e ´ d
×V 反總÷W÷T= 66.4×△A÷W
ε :愈創木酚摩爾消光系數:12100L/mol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V 反總:反應總體積, 0.2mL;W:樣本質量,g;T:反應時間,3h
b. 用 96 孔板測定的計算公式如下
酶活性定義:每克土壤每天氧化 1nmol 愈創木酚所需的酶量為一個酶活力單位。
S-MnP 活性(nmol/d /g 土樣)=
DA
e ´ d
×V 反總÷W÷T= 132.8×△A÷W
土壤錳過氧化物酶(S-Mnp)檢測試劑盒ε :愈創木酚摩爾消光系數:12100L/mol/cm;d:比色皿光徑,0.5cm;V 反總:反應總體積, 0.2mL;W:樣本質量,g;T:反應時間,3h
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