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規(guī)格	50T/100T	儀器	分光光光度計(jì)/酶標(biāo)儀
運(yùn)輸	常溫	保質(zhì)期	三個(gè)月
品牌	合肥萊爾生物科技有限公司	訂購方式	聯(lián)系客服
保存	按說明書	貨期	現(xiàn)貨

土壤堿性蛋白酶（S-ALPT）檢測試劑盒說明書，正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義：

土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機(jī)化合物的轉(zhuǎn)化，其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。S-ALPT 在堿性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解，與土壤有機(jī)質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān)。

測定原理：

堿性條件下，S-ALPT 可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸；在堿性條件下，酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán)；在 680nm 有特征吸收峰。

土壤堿性蛋白酶（S-ALPT）檢測試劑盒自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96 孔板、雙蒸水

試劑組成和配置：

試劑一：液體 30mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入 5ml 蒸餾水充分溶解；用不完的試劑 4℃保存；試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入 50μ L 試劑七使粉劑潤濕，然后加入 10ml 試

劑一，轉(zhuǎn)入燒杯中沸水浴磁力攪拌溶解后待用；用不完的試劑 4℃保存；

試劑四：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入 20ml 蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑 4℃ 保存；

試劑五：液體 3mL×1 瓶，4℃保存；

試劑六：液體 1.5mL×1 支，0.05mg/ml 標(biāo)準(zhǔn)酪氨酸溶液，4℃保存；試劑七：液體 1.5mL×1 支，4℃保存；

樣品處理：

新鮮土樣自然風(fēng)干或 37 度烘箱風(fēng)干，過 30~50 目篩。

測定操作：

1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 680nm，蒸餾水調(diào)零。

2、試劑二、三和四 40℃水浴 10min。

3、樣本測定：

試劑名稱	測定管	對照管
風(fēng)干土樣（g）	0.01	0.01
試劑一（μ L）	50	150
試劑三（μ L）	100

土壤堿性蛋白酶（S-ALPT）檢測試劑盒混勻后，40℃水浴 30min，振蕩 5-6 次，使土樣與反應(yīng)液充分接觸

試劑二（μ L）

混勻，8000g 25℃離心 10min，取上清液，在 EP 管或 96 孔板中加入下列試劑

	測定管	對照管	標(biāo)準(zhǔn)管
上清液（μ L）	30	30
試劑六（μ L）			30
試劑四（μ L）	140	140	140
試劑五（μ L）	30	30	30

混勻，40℃水浴 20min，680nm 下讀取各管吸光值A(chǔ)

注意：標(biāo)準(zhǔn)管只需測一次。每個(gè)測定管設(shè)一個(gè)對照管。

S-ALPT 活性計(jì)算：

單位定義：每天每g 土樣中產(chǎn)生 1mg 酪氨酸為一個(gè) S-ALPT 活力單位。

S-ALPT(mg/d/g)=C 標(biāo)準(zhǔn)×(A 測定管-A 對照管)÷A 標(biāo)準(zhǔn)管×V 反總÷W÷T=48×(A 測定管-A 對照管)÷A 標(biāo)準(zhǔn)管

土壤堿性蛋白酶（S-ALPT）檢測試劑盒C 標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，0.05mg/mL；V 反總：反應(yīng)體系總體積，0.2mL；T：反應(yīng)時(shí)間，30min=1/48d； W：樣本質(zhì)量，0.01g。

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