土壤酸性蛋白酶（S-ACPT）檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書，正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義：

土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機(jī)化合物的轉(zhuǎn)化， 其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。S-ACPT 在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解，與土壤有機(jī)質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān)。

測(cè)定原理：

酸性條件下，S-ACPT 可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸；在堿性條件下，酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán)；在 680nm 有特征吸收峰。

土壤酸性蛋白酶（S-ACPT）檢測(cè)試劑盒自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96 孔板、雙蒸水

試劑組成和配置：

液體一：1mL×1 支，4℃保存。液體二：0.5mL×1 支，4℃保存。

試劑一的配制：臨用前按液體一：液體二：蒸餾水=90（μ  L）：20（μ  L）：21（mL）的比例配制，現(xiàn)配現(xiàn)用，如出現(xiàn)白色絮狀沉淀則不能用。

試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入 5ml 蒸餾水充分溶解；用不完的試劑 4℃保存； 試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入 50μ L 試劑七使粉劑潤(rùn)濕，然后加入 10ml 試劑一，轉(zhuǎn)入燒杯中沸水浴磁力攪拌溶解后待用；用不完的試劑 4℃保存；

試劑四：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入 20ml 蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑 4℃ 保存；

試劑五：液體 3mL×1 瓶，4℃保存；

試劑六：液體 1.5mL×1 支，0.05mg/ml 標(biāo)準(zhǔn)酪氨酸溶液，4℃保存； 試劑七：液體 1.5mL×1 支，4℃保存；

樣品處理：

新鮮土樣自然風(fēng)干或 37 度烘箱風(fēng)干，過(guò) 30~50 目篩。

測(cè)定操作：

1、 試劑一的配制：見試劑的組成和配制。

2、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 680nm，蒸餾水調(diào)零。

3、試劑二、三和四 40℃水浴 10min。

3、樣本測(cè)定：