土壤過氧化氫酶(S-CAT)試劑盒-微量法注意：正式測定前務(wù)必取2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

規(guī)格：100T/48S

產(chǎn)品內(nèi)容：

試劑一：液體×1 瓶，4℃保存；臨用前加入29.7mL 蒸餾水充分溶解后待用；用不完的試劑4℃ 保存；

試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入1mL 蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存； 試劑三：液體×1 瓶，4℃保存。

土壤過氧化氫酶(S-CAT)試劑盒-微量法產(chǎn)品說明：

S-CAT 是土壤微生物代謝的重要酶類，在H2O2 清除系統(tǒng)中具有重要作用。

H2O2 在240nm 下有特征吸收峰，通過測定與土壤反應(yīng)后溶液在此波長下吸光度的變化，即可反應(yīng)S-CAT 活性的高低。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板（UV 板）和蒸餾水

操作步驟：

一、樣品處理：

新鮮土樣自然風(fēng)干或 37  度烘箱風(fēng)干，過 30~50 目篩。二、測定步驟：

1、 分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長至240nm，蒸餾水調(diào)零。

2、 加樣表

土壤過氧化氫酶(S-CAT)試劑盒-微量法混勻，取200uL 至微量石英比色皿或96  孔板中，240nm  處記錄各管吸光值A(chǔ)。注意：每個測定管要設(shè)一個無基質(zhì)管，無土管只要做一管。

三、S-CAT 活性計算：

A、用微量石英比色皿測定的計算公式如下

單位的定義：每天每g 風(fēng)干土樣催化1μmol H2O2 降解定義為一個酶活力單位。

計算公式：S-CAT（μmol/d/g）＝[(A 無土管-A 測定管+A 無基質(zhì)管)×V 反總÷（ε×d）

×106]÷W÷T=16.5×（A 無土管-A 測定管+A 無基質(zhì)管）

V 反總：反應(yīng)體系總體積，3×10-4 L；ε：過氧化氫摩爾消光系數(shù)，4.36×104 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm； T：反應(yīng)時間，20 min=1/72d； W：樣本質(zhì)量，0.03g。

土壤過氧化氫酶(S-CAT)試劑盒-微量法B、用96 孔板測定的計算公式如下

單位的定義：每天每g 風(fēng)干土樣催化1μmol H2O2 降解定義為一個酶活力單位。

計算公式：S-CAT（μmol/d/g）＝[(A 無土管-A 測定管+A 無基質(zhì)管)×V 反總÷（ε×d）

×106]÷W÷T=33×（A 無土管－A 測定管+A 無基質(zhì)管）

V 反總：反應(yīng)體系總體積，3×10-4 L；ε：過氧化氫摩爾消光系數(shù)，4.36×104 L / mol /cm；d：96

孔板光徑，0.5cm； T：反應(yīng)時間，20 min=1/72d； W：樣品質(zhì)量，0.03g。