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規格 | 50T/100T | 儀器 | 分光光光度計/酶標儀 |
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運輸 | 常溫 | 保質期 | 三個月 |
品牌 | 萊爾生物 | 訂購方式 | 聯系客服 |
保存 | 按說明書 | 貨期 | 現貨 |
土壤堿性蛋白酶試劑盒-微量法注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
規格:100T/48S
產品內容:
試劑一:液體20mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入10mL試劑一,沸水浴攪拌溶解后待用; 試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入10mL 蒸餾水充分溶解待用;
試劑四:液體20mL×1 瓶,4℃保存;
試劑五:液體5mL×1 瓶,4℃保存;
標準品:液體1mL×1 支,0.25 μmol/mL 酪氨suan溶液,4℃保存。
土壤堿性蛋白酶試劑盒-微量法產品說明:
土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質以及其他含蛋白質氮的有機化合物的轉化,其水解產物是高等植物的氮源之一。土壤堿性蛋白酶在堿性環境下催化蛋白質水解,與土壤有機質含量、氮素及其他土壤性質有關。堿性條件下,土壤堿性蛋白酶可將酪蛋白水解產生酪氨suan;在堿性條件下,酪氨suan還原磷鉬酸化合物生成鎢藍,在680nm 有特征吸收峰。
實驗中所需儀器及設備:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液槍、微量比色皿/96孔板、蒸餾水、50目篩(或更小)。
樣品處理:
新鮮土樣自然風干或 37℃烘箱風干,過 30~50 目篩。
土壤堿性蛋白酶試劑盒-微量法操作步驟:
1、分光光度計/酶標儀預熱30min 以上,調節波長至680nm,蒸餾水調零。
2、樣本測定:
試劑名稱 | 測定管 | 對照管 | 標準管 | 空白管 |
風干土樣(g) | 0.05 | 0.05 | - | - |
試劑一(μL) | 50 | 50 | - | - |
試劑二(μL) | 100 | - | - | |
混勻后,37℃反應24h,期間振蕩5-6 次,使土樣與反應液充分接觸。 | - | - | ||
試劑三(μL) | 100 | 100 | - | - |
試劑二(μL) | - | 100 | - | - |
混勻,10000rpm 室溫離心10min,取上清液 | - | - | ||
上清液(μL) | 44 | 44 | - | - |
標準液(μL) | - | - | 44 | - |
蒸餾水(μL) | - | - | - | 44 |
試劑四(μL) | 130 | 130 | 130 | 130 |
試劑五(μL) | 26 | 26 | 26 | 26 |
混勻,40℃水浴 10min,10000rpm 室溫離心 10min,取上清液于 680nm 下讀取各管吸光值 A,分別記為 A 測定管、A 對照管、A 標準管、A 空白管,計算ΔA 測定=A 測定管-A 對照管,ΔA 標準=A 標準管-A 空白管。 |
注意:標準管、空白管只需測一次。每個測定管設一個對照管。
土壤堿性蛋白酶試劑盒-微量法活性計算:
單位定義:每天每g土樣中產生1μmol 酪氨suan為一個土壤堿性蛋白酶活力單位。
土壤堿性蛋白酶(U/g)=C標準×ΔA測定÷ΔA標準×V 反總÷W÷T= 0.0625×ΔA測定÷ΔA標準÷W。C 標準管:標準管濃度,0.25 μmol/mL;V 反總:酶促反應總體積,0.25mL;T:反應時間,
1d;W:樣本質量,g。
注意事項:
1、當吸光值大于1.5時,建議將上清液稀釋后進行測定,計算時注意乘以稀釋倍數。
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