當前位置:合肥萊爾生物科技有限公司>>生化試劑盒>>土壤系列>> 土壤亮氨/酸氨基肽酶(S-LAP)試劑盒-微量法
規格 | 50T/100T | 儀器 | 分光光光度計/酶標儀 |
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運輸 | 常溫 | 保質期 | 三個月 |
品牌 | 萊爾生物 | 訂購方式 | 聯系客服 |
保存 | 按說明書 | 貨期 | 現貨 |
土壤亮氨/酸氨基肽酶(S-LAP)試劑盒-微量法注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
規格:100T/48S
產品內容:
試劑一:液體30mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存;臨用前加入3mL丙/酮溶解。
產品說明:
S-LAP是一類能水解肽鏈N-末端為亮氨/酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP活性變化與機體某些病理狀態密切相關。
S-LAP分解L-亮氨/酸對硝基苯胺生成對硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算S-LAP活性。
土壤亮氨/酸氨基肽酶(S-LAP)試劑盒-微量法自備實驗用品及儀器:
天平、離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、甲苯、丙/酮、30目篩(或更?。?。
操作步驟:
一、樣本處理
土樣自然風干,過30-50目篩。
二、測定步驟
1、分光光度計/酶標儀預熱30min以上,波長調至405nm,蒸餾水調零。
2、加樣表:
測定管 | 對照管 | |
土樣(g) | 0.03 | 0.03 |
甲苯(µL) | 15 | 15 |
震蕩混勻,室溫靜置15min。 | ||
試劑一(µL) | 255 | 255 |
試劑二(µL) | 30 | - |
30℃水浴反應1h后立刻煮沸5min。流水冷卻至室溫。 | ||
試劑二(µL) | - | 30 |
14000g 常溫離心10min,取200µL上清于405nm處測定吸光值,分別記為A測定管、A對照管,計算?A=A測定管-A對照顧管。 |
土壤亮氨/酸氨基肽酶(S-LAP)試劑盒-微量法三、酶活計算公式
1.按微量比色皿計算:
酶活性定義:每克土壤每分鐘生成1nmol 對硝基苯胺為一個酶活力單位。
S-LAP 活性(U/g)=△A÷(ε×d) ×109×V反總÷W÷T=0.507×△ A÷W 。
ε:對硝基苯胺摩爾消光系數:9.87×103 L/mol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V 反總:反應總體積,300µL=3×10-4 L;W:土樣質量,g;T:反應時間,60min;109:單位換算系數,1mol=109nmol。
2.按96孔板計算:
酶活性定義:每克土壤每分鐘氧化1nmol 對硝基苯胺為一個酶活力單位。
S-LAP 活性(U/g)=△A÷(ε×d) ×109×V反總÷W÷T=0.844×△ A÷W 。
ε:對硝基苯胺摩爾消光系數:9.87×103 L/mol/cm;d:96 孔板光徑,0.6cm;V 反總:反應總體積,300µL=3×10-4 L;W:土樣質量,g;T:反應時間,60min;109:單位換算系數,1mol=109nmol。土壤亮氨/酸氨基肽酶(S-LAP)試劑盒-微量法
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