土壤無機(jī)磷(S-PHOS)試劑盒-微量法注意:正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定o

測(cè)定意義：

磷是植物必需大?元素o植物K要通過根系從土壤中獲取磷元素o土壤磷包括有機(jī)磷和無機(jī)  磷o(hù)土壤有機(jī)磷?過礦化分解而轉(zhuǎn)化fi無機(jī)磷,才能進(jìn)一步被植物吸收利用o

測(cè)定原理：

從土壤中提取無機(jī)磷,在酸性環(huán)境中,通過鉬藍(lán)法定磷,%afi算出無機(jī)磷含?o

自備儀器和用品：

a見分光光度fi/酶標(biāo)儀s微?玻璃比色皿/96 孔板sp式離心機(jī)sa調(diào)式水浴鍋,分析天?s

a調(diào)式移液器s蒸餾水和 100 目篩子o

土壤無機(jī)磷(S-PHOS)試劑盒-微量法試劑組成和配制：

提取液:液體×1 瓶,4℃保存o 試劑二:液體×1 瓶,4℃保存o

試劑й:粉劑×1 瓶,4℃避光保存o臨用前配制,加入 8mL 蒸餾水,充分溶解后加入 4mL

試劑二,混勻o

標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1 支,20µmol/L 無機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存o

土壤無機(jī)磷提?。?/span>

取 10mL 離心管,加入精確?取的 100 目篩子過篩的風(fēng)?土樣約 0.01g,加入 1mL 提取液, 震蕩混勻,然后置于 40℃水浴浸提 1h,8000g,25℃,離心 10min,取k清液,待測(cè)o

土壤無機(jī)磷(S-PHOS)試劑盒-微量法測(cè)定步驟：

1.分光光度fi/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min 以k,調(diào)節(jié)波長到 660 nm,蒸餾水調(diào)零o

2.打開水浴鍋,調(diào)節(jié)溫度到 40℃o

3.空白管:取EP 管,依次加入 100µL 蒸餾水,100μL 試劑й,混勻后置于 40℃水浴保溫10min,室溫冷K 10 min 后于 660 nm 測(cè)定吸光度,記fi A 空白管o

4.標(biāo)準(zhǔn)管:取 EP 管,依次加入 10µL 標(biāo)準(zhǔn)液,90µL 蒸餾水,100µL 試劑й,混勻后置于

40℃水浴保溫 10min,室溫冷K 10 min 后于 660 nm 測(cè)定吸光度,記fi A 標(biāo)準(zhǔn)管o

5.測(cè)定管:取 EP 管,依次加入 10µL k清液,90µL 蒸餾水,100µL 試劑й,混勻后置于

40℃水浴保溫 10min,室溫冷K 10 min 后于 660 nm 測(cè)定吸光度,記fi A 測(cè)定管o 需在 40min 內(nèi)完成比色o

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次o

土壤無機(jī)磷含量計(jì)算公式：

a.使用微?石英比色皿測(cè)定的fi算公式如f

S-PHOSCµmol /g  ?重3=[C 標(biāo)準(zhǔn)液×(A 測(cè)定—A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)—A 空白)]×V 總÷W

=0.02×(A 測(cè)定—A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)—A 空白)÷W

C 標(biāo)準(zhǔn)液:20 µmol/L:V 總:總k清液體?,1 mL=0.001 L:W:土壤樣品質(zhì)?,go b.使用 96 孔板測(cè)定的fi算公式如f

S-PHOSCµmol /g ?重3=[C 標(biāo)準(zhǔn)液×(A 測(cè)定—A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)—A 空白)]×V 總÷W

=0.02×(A 測(cè)定—A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)—A 空白)÷W

C 標(biāo)準(zhǔn)液:20 µmol/L:V 總:總k清液體?,1 mL=0.001 L:W:土壤樣品質(zhì)?,go

土壤無機(jī)磷(S-PHOS)試劑盒-微量法注意事項(xiàng)：

1.試劑й需臨用前配制,限當(dāng)天使用o試劑й配制過程中,a能會(huì)產(chǎn)生黑色固體,其不影響結(jié)果,注意吸取時(shí)不要將黑色固體吸入o

2.40min 內(nèi)完成比色o