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犬維生素K1(VK1)ELISA試劑盒說明書

時間:2021/7/22閱讀:74
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犬維生素K1(VK1)ELISA試劑盒

英文名稱:Dog vitamin K1 (VK1) ELISA Kit

產品規格:96T/48T

產品貨號:KS11674
品牌:科順生物
試劑盒特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷

犬維生素K1(VK1)ELISA試劑盒的服務承諾:

一、產品質量保證,有問題免費包換

二、提供免費代測服務(為客戶提供來樣檢測服務,限度實驗結果的有效性)

三、提供全程技術指導

 運輸方式:快遞(根據客戶要求,選擇具體的運輸方式),距離近且急需使用的產品可以送貨上門
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等。

犬維生素K1(VK1)ELISA試劑盒操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3.  樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4.  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

犬維生素K1(VK1)ELISA試劑盒實驗操作注意事項

1.  嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。

5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。

6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。

7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。

9. 不能使用過期產品。

10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。

犬維生素K1(VK1)ELISA試劑盒待測在接到客戶標本當日起,現貨產品一周內將檢測報告交到客戶手中!多年專業服務,質量保證,可免費提供代測服務,期待您的留言和咨詢!

 

 

 

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被牛β乳球蛋白(β-Lg)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的牛β乳球蛋白(β-Lg)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。理及要求

1.  血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一夜后于2000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2.  血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 2000g離心20分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3.  細胞培養物上清或其它生物標本:2000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響zui后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。需的

酶標儀(450nm)

高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

37℃恒溫箱

蒸餾水或去離子水 

試劑盒組成

名稱

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標板

8孔×12

8孔×6

標準品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

樣本稀釋液

6mL

3mL

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說明書進行稀釋

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

終止液

6mL

3mL

封板膜

2張

2張

說明書

1份

1份

自封袋

1個

1個

1.  標準品濃度依次為:200、100、50、25、12.5、0 μg/mL

2.  經過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內,實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過zui大標準品濃度時,可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。

 嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。

避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。

在儲存和溫育時避免強光直接照射。

平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。

不能使用過期產品。

如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。劑準備

試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡后方可使用。

20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

 

操作步驟

  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

 樣本孔待測樣本50μL;空白孔不加。

除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

 所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品濃度。

 檢測范圍6.25 μg/mL  200 μg/mL。

靈敏度:低檢測濃度小于1.0 μg/mL

特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

重復性:板內變異系數小于10% ,板間變異系數小于15% 。

 說明

由于現有條件及科學技術水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析,本產品可能存在一定的質量技術風險。

終的實驗結果與試劑的有效性、實驗者的相關操作以及當時的實驗環境密切相關,請務必準備充足的標本備份。

不同批次的同一產品可能會有少許差別,如:檢測限、靈敏度以及顯色時間等,請依據試劑盒內說明書進行實驗操作,電子版說明書僅作參考。

只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產品。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到*的檢測結果。

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