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上海科順生物科技有限公司
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人切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)ELISA試劑盒說明書

時(shí)間:2021/7/22閱讀:77
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人切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)ELISA試劑盒
英文簡(jiǎn)稱People excision repair cross complementing 1 (ERCC1) ELISA kit

產(chǎn)品貨號(hào):KS15067

品牌名稱:科順生物 
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
運(yùn)輸方式:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運(yùn)輸方式)
產(chǎn)品價(jià)格:*,歡迎在線留言洽談!
使用范圍:僅供科研檢測(cè),不得用于臨床.

人切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠胰島素(INS)水平。用純的小鼠胰島素(INS)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素(INS),再與HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催下轉(zhuǎn)成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠胰島素(INS)含量。

人切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)ELISA試劑盒組成

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1份

1份

 

封板膜

2片

2片

 

密封袋

1個(gè)

1個(gè)

 

酶標(biāo)包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

0.3ml×6管

0.3ml×6管

2-8℃保存

酶標(biāo)試劑

5 ml×1瓶

10 ml×1瓶

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑A液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑B液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

終止液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

20×濃縮洗滌液

15ml×1瓶

25ml×1瓶

2-8℃保存

注:標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.

人切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)ELISA試劑盒樣本處理及要求

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧物酶的(HRP)活性。

 

人切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)ELISA試劑盒操作步驟

  • 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;。
  • 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
  • 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑100μl,空白孔除外。
  • 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
  • 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
  • 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
  • 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
  • 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
  • 測(cè)定:以空白孔調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

人切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)

  • 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
  • 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
  • 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zuei好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
  • 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,zuei好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第yi孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
  • 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  • 底物請(qǐng)避光保存。
  • 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
  • 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
  • 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

計(jì)算:

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),    

在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD      

值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋      

倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)      

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值      

代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋      

倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。                  

人切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)ELISA試劑盒相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:

KS14963 人卵巢癌抗原X1(OVX1)ELISA試劑盒

KS14964 人卵磷脂膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶(LCAT)ELISA試劑盒

KS14965 人卵泡抑素樣蛋白1(FSTL1)ELISA試劑盒

KS14966 人氯離子胞內(nèi)通道蛋白4(CLIC4)ELISA試劑盒

KS14967 人麥考酚酸(MPA)ELISA試劑盒

KS14968 人錨蛋白B(AnKS)ELISA試劑盒

KS14969 人鎂依賴性磷酸酶1(MDP1)ELISA試劑盒

KS14970 人錳超氧化物歧化酶(SOD2)ELISA試劑盒

KS14971 人糜蛋白酶(Chymase)ELISA試劑盒

KS14972 人免疫球蛋白GFc片段(Fcγ)ELISA試劑盒

KS14973 人免疫球蛋白γ1鏈C區(qū)(IGHGI)ELISA試劑盒

KS14974 人免疫球蛋白結(jié)合蛋白(BIP)ELISA試劑盒

KS14975 人免疫球蛋白輕鏈kappa(κIgLC)ELISA試劑盒

KS14976 人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(AMH)ELISA試劑盒

KS14977 人膜結(jié)合型IgM(mIgM)ELISA試劑盒

KS14978 人膜聯(lián)蛋白Ⅰ(ANXⅠ)ELISA試劑盒

KS14979 人膜聯(lián)蛋白Ⅱ(ANXⅡ)ELISA試劑盒

KS14980 人膜聯(lián)蛋白Ⅲ(ANXⅢ)ELISA試劑盒

KS14981 人膜聯(lián)蛋白Ⅳ(ANXⅣ)ELISA試劑盒

KS14982 人膜聯(lián)蛋白Ⅵ(ANXⅥ)ELISA試劑盒

KS14983 人膜聯(lián)蛋白Ⅶ(ANXⅦ)ELISA試劑盒

KS14984 人膜聯(lián)蛋白A5(AnnexinA5)ELISA試劑盒

KS14985 人膜內(nèi)氨酰氨基肽酶(ANPEP)ELISA試劑盒

KS14986 人母親DPP同源物4(Smad4)ELISA試劑盒

KS14987 人鈉氯化物依賴性牛磺酸轉(zhuǎn)運(yùn)體(SLC6A6/TAUT)ELISA試劑盒

KS14988 人難辨梭狀芽孢桿菌毒素A(TOXA)ELISA試劑盒

KS14989 人難辨梭狀芽孢桿菌毒素B(TOXB)ELISA試劑盒

KS14990 人腦腸肽(Ghrelin)ELISA試劑盒

KS14991 人腦鈉素(BNP)ELISA試劑盒

KS14992 人腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒

KS14993 人內(nèi)皮素(ET1)ELISA試劑盒

KS14994 人內(nèi)皮素1受體(EDNRA)ELISA試劑盒

KS14995 人內(nèi)皮素2(EDN2)ELISA試劑盒

KS14996 人內(nèi)皮糖蛋白(ENG/CD105)ELISA試劑盒

KS14997 人內(nèi)皮細(xì)胞特異分子1(ESM1)ELISA試劑盒

KS14998 人內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)ELISA試劑盒

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