HTR-8細胞;人滋養(yǎng)層
基本信息
產(chǎn)品名稱：HTR-8細胞;人滋養(yǎng)層
細胞數(shù)量：1*10^6
細胞種屬：人源
生長特性：貼壁
培養(yǎng)基：DMEM
細胞凍存：液氮凍存（凍存液基礎(chǔ)培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO）
細胞運輸：干冰運輸（2ml凍存管）或活細胞運輸（T25瓶）
注意事項
凍存細胞接收后的處理：1.干冰運輸，收到細胞后立即轉(zhuǎn)入-80℃冰箱短暫中轉(zhuǎn)或直接復(fù)蘇；
2.收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已經(jīng)完，全揮發(fā)、凍存管瓶蓋破裂脫落,請立即拍照后與我們聯(lián)系。
復(fù)蘇細胞接收后的處理：1.收到細胞后，請首先檢查培養(yǎng)瓶是否破損或漏液，培養(yǎng)液是否混濁，如有漏液及培養(yǎng)液混濁情況請立即拍照把圖片發(fā)給我們。
2.75%酒精消毒瓶身后放培養(yǎng)箱中靜置4-6h后，在顯微鏡下確認細胞狀態(tài)并拍照100倍和200倍的照片，若有貼壁細胞脫落，可收集上清離心，將沉淀用新的培養(yǎng)基接種至新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中。
3.建議收到當天不要消化處理，如果細胞長滿90%，可選擇傳代處理。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；，
②加入2ml0.25%胰，酶（T25瓶），使胰，酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
?、?-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入完，全培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
?、萦眯迈r培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
?、迲腋〖毎苯与x心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
?、賹龃婀茉?7℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
?、谠?000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰，蛋白，酶（T25瓶）
?、?-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入完，全培養(yǎng)基終止消化；
?、蹖⒓毎麘乙?000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
?、軐龃婀芊湃氤绦蚪禍睾校湃?80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
細胞售后服務(wù)
一、收到細胞處理方法
1、收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置若干小時（視細胞密度而定）穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài)，100x，200x各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。
2、收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我單位負責免費重發(fā)一次細胞。
3、收到細胞后，可將培養(yǎng)瓶里多余的培養(yǎng)基收集放置于4℃?zhèn)溆谩傞_始培養(yǎng)時，建議用瓶內(nèi)的培養(yǎng)基，可補加2%血清，待細胞狀態(tài)恢復(fù)后，培養(yǎng)液一半用瓶內(nèi)的，一半用用戶自備的，使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件，以免因不適應(yīng)而造成生長狀態(tài)不佳。
二、細胞出現(xiàn)問題，可重發(fā)的情況有哪些？判定標準是什么？
1、細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等，重發(fā)；
2、細胞污染問題，請在收到產(chǎn)品24小時內(nèi)，給我們提出真實的實驗結(jié)果，核實后重發(fā)；
3、常溫發(fā)貨的細胞靜置24小時后，絕大多數(shù)細胞未存活（需提供真實清晰的細胞狀態(tài)照片），重發(fā)；
4、干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細胞未存活（需提供真實清晰的細胞狀態(tài)照片），重發(fā)；
5、干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇后24小時或常溫發(fā)貨的細胞靜置4小時后并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
6、細胞活性問題，請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我單位提出真實的實驗結(jié)果（用臺盼藍染色法鑒定細胞活力），核實后予重發(fā)；
7、視具體情況而定。
三、細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
1、用戶操作造成細胞污染，不重發(fā)；
2、用戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
3、非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
4、細胞狀態(tài)不好，未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細胞狀態(tài)照片，不重發(fā)；
5、細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題的，不重發(fā)；
6、細胞收到2天內(nèi)，未告知的，不重發(fā)；
7、視具體情況而定。
四、其他服務(wù)政策（僅，限細胞系）
1、細胞出現(xiàn)問題后，未能及時反饋的，不能免費重發(fā)，如需重發(fā)，用戶需重新支付的費用，具體視情況而訂。
2、如客戶收到細胞8-30天之內(nèi)，因處理不當造成細胞死亡或污染，用戶需重新支付的費用，具體視情況而訂。
