一、801-D（人巨細胞性肺癌細胞）詳情
種屬人年齡（性別）
組織來源
生長特性貼壁
細胞形態上皮細胞樣
背景描述801-D細胞是人肺巨細胞癌高轉移株；據報道，801-D細胞具有高表達的端粒酶活性，可用于肺癌的基礎和臨床研究。
生長培養基RPMI-1640＋10%FBS＋1%P/S
培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃
二、細胞接收后的處理：
1、貼壁細胞
收到T25方瓶細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發給我們（凍存管細胞收到后直接37℃水浴復蘇或直接放置于液氮中長期儲存）。
請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
棄去T25瓶中的培養基，換用新鮮的完quan 培養基。
如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代。
接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系。
2、懸浮細胞
收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發給我們。
請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態，去掉封口膜并將15ml離心管置于37℃培養約2-3h。
1200rpm離心5min，棄去15ml離心管中的培養基，細胞沉淀用新鮮的完quan培養基重懸并培養。
如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代。
接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系。
本公司的細胞培養操作規程，供參考
一、培養基及培養凍存條件準備：
準備RPMI-1640培養基，90%；優質胎牛血清，10%。
培養條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化2-3分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。
輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1200RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加入1mL培養液后吹勻。
移入到事先準備好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，先要消化處理并進行細胞計數。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行，最后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數后離心，用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
注意事項：
1.收到凍存管細胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。
2.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
3.細胞用途：僅供科研使用。
