人卵巢癌腺癌細胞
平臺編號:zl-077233
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
細胞信息:NIH:OVCAR-8
一、細胞基本屬性
細胞名稱NIH:OVCAR-8人卵巢癌腺癌細胞（STR鑒定正確）
種屬來源人
年齡性別卵巢
生長特性貼壁生長
細胞形態(tài)上皮樣細胞
細胞代數(shù)10代以內
生物安全等級1
細胞規(guī)格1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測無
保藏機構ATCC
培養(yǎng)基1640+10%FBS
培養(yǎng)條件氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件無血清凍存液，液氮儲存
運輸方式復蘇發(fā)貨（T25瓶免運輸費用）/凍存發(fā)貨（需加干冰運輸費用）
供應限制僅xian于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
特別說明以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主
二、細胞培養(yǎng)操作
收貨方式T25瓶凍存管
收貨處理觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁，將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)收到細胞后，需立即轉入液氮凍存或直接復蘇
傳代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)第二天換液并檢查細胞密度
傳代比例首ci傳代建議1：2傳代
1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿一管細胞建議接種到6cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
傳代方法
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml完quan培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
注意事項
1.運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完quan培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。
2.因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞si亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。
1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完，檢查凍存管是否融化，若已融化需直接離心細胞接種觀察，若未融化可以將細胞按正常步驟保存；
2.為保證細胞的高存活率，收到產(chǎn)品后，請立即解凍復蘇細胞。
到貨須知
1.收到細胞后，首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否完quan揮發(fā)，細胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2.靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照（當天以及第2,3天請拍照），記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
三、細胞凍存操作
凍存液配方無血清凍存液，液氮儲存
細胞密度待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例
凍存方法a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5x106~1x107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性，若有異常，及時調整實驗方案
