DU4475細胞（提供STR鑒定報告）
（1）英文名稱：DU4475
（2）中文名稱：人乳腺上皮細胞
（3）細胞描述：該細胞源自一位70歲白人女性的乳腺癌組織，電鏡觀察該細胞有大量橋粒及交錯的微絨毛。在本庫通過STR鑒定結果正確，其鑒定結果如下：Amelogenin：X；CSF1PO：9，12；D13S317：11，14；D16S539：11，12；D18S51：14，16；D19S433：14；D21S11：29，31.2；D2S1338：20，25；D3S1358：14，16；D5S818：11；D7S820：9，10；D8S1179：10，13；FGA：22，25；TH01：6，8；TPOX：8；vWA：17；
（4）規格：T25方瓶或1ml凍存管
（5）細胞數量：1×10^6
（6）組織來源：人乳腺
（7）生長方式：貼壁生長
（8）細胞形態：上皮型
（9）培養液：RPMI-1640+10%FBS+1%P/S
（10）培養條件：37℃，5%CO2
（11）運輸方式：常溫運輸（T25方瓶）或干冰運輸（凍存管）
細胞接收后的處理：
1）收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發給我們。
2）請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養基，添加6ml新的完quan 培養基。
4）如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代。
5）接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系。
運輸和保存：可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式：（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；（2）存活細胞，收到后應繼續生長，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4.收到細胞后首ci傳代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中，建議客戶凍存一支備用，后續傳代根據實際情況按1:2到1:5的比例進行。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。
下面T25瓶為類；
1，細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰mei，細胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2，4min 1000rpm離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。
3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、注意事項：
1收到細胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。
2瓶中運輸的培養液不能重復使用，請換新鮮培養液培養
3對于貼壁細胞，若大部分細胞漂浮，置于培養箱隔夜觀察，大部分漂浮細胞重新貼壁，表明細胞活力正常，繼續培養，剩余漂浮的細胞可以去掉；若大部分細胞仍然不貼壁，將漂浮的細胞離心收集，用臺盼藍染色鑒定細胞活力，并與本公司銷售人員及時聯系。
4建議客戶收到細胞后前3天不同倍鏡各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，如細胞出現問題請于一周內與本公司銷售聯系，以便于更好的幫您解決問題。
