包裝規(guī)格:
特點:
1.單電纜電源,寬電壓適應(yīng)
2.包含紫外透射燈的電泳池
3.緩沖液排出角
4.可分拆的電泳池蓋子,用于形成暗室
5.紫外防護罩,可以拆下
6.帶濾光片的暗室罩子,用于凝膠拍照,可以拆下
7.特殊設(shè)計的梳子,用于制作點樣孔和收集孔
8.一次同時檢測80個樣品的DNA擴增
9.一次同是純化20個樣品的DNA擴增
產(chǎn)品參數(shù):
1.主體 240毫米(長) X 270毫米(寬) X 84毫米(高)
2.電泳池 135毫米(長) X 185毫米(寬) X 50毫米(高)
紫外部分 60毫米(長) X 170毫米(寬)
3.紫外燈: 210.5毫米(長)X 15.5毫米(直徑)
功率 6W
波長范圍 280nm—360nm
峰值波長 302nm
平均使用壽命3000小時
4.電泳池蓋子,用于形成暗室
148毫米(長) X 220毫米(寬) X 60毫米(高)
5.紫外防護罩 148毫米(長) X 212毫米(寬) X 53毫米(高)
6.用于凝膠拍照的暗室罩子
147毫米(長) X 198毫米(寬) X 210毫米(高)
紫外/紅外截止濾光片 35毫米(直徑)
7.小型凝膠(7孔)58毫米 X 59毫米
大型凝膠(13孔)101毫米 X 59毫米
8.安全微開關(guān)
125VAC時5A,250VAC時3A
9.電氣規(guī)格
輸入電壓:220V交流,60Hz或110V交流,50/60Hz
輸出:直流100—110V,用于電泳。
交流100—110V,用于紫外燈
功率:30VA
客戶名單:
美國哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院
美國約翰霍普金斯大學(xué)
美國加州大學(xué)
美國芝加哥大學(xué)
美國南達科他大學(xué)
日本早稻田大學(xué)
日本里肯腦科學(xué)研究所
日本IWATE醫(yī)學(xué)院
加拿大GRAIN實驗室
加拿大阿爾伯特大學(xué)
加拿大UBC大學(xué)
加拿大渥太華自然資源研究院
加拿大MCGILL大學(xué)
韓國,南非,巴西,中國臺灣,泰國,新加坡,英國,智利等國家有幾百用戶。
客戶評價:
“NA100®節(jié)省了我大量的時間,的確是很實用的新儀器!”
----韓國首爾大學(xué) 張載豪 教授
產(chǎn)品特性:
NA 100® 的特性
DNA擴增
↓
NA 100方法 傳統(tǒng)方法
↓ ↓
電泳,檢查擴增子,同時純化DNA 電泳
↓
移動凝膠到紫外透射燈上檢查條帶
↓
DNA純化步驟花費超過30分鐘和額外的試劑費用
在進行一次電泳后確認的80個PCR產(chǎn)物的條帶。
在NA100中用一個常規(guī)照相機拍攝的圖片
NA100純化PCR產(chǎn)物后的序列數(shù)據(jù)
分子尺寸標(biāo)記,1bp梯度,來源于NA100純化的DNA克隆。
相關(guān)技術(shù),實驗方法介紹:
電泳的通用技術(shù)
。
。
A.凝膠的準(zhǔn)備
1. 在微波中熔化瓊脂糖并在60℃放置超過1小時使之冷卻。這可以防止
凝膠托盤的熱損傷,而且可以移除熔化時產(chǎn)生的微空氣泡。
* 凝膠托盤具有高度的紫外透過性。然而,容易被熱損傷(80℃),乙醇,二甲苯等有機
溶劑也會損傷它。
.
2. 組裝凝膠托盤和凝膠澆鑄器。
* 如果在這一步組裝了梳子,有很高的可能性在凝膠里穿透孔的底部。
.
3. 把熔化的瓊脂糖倒入凝膠托盤
4. 在熔化的瓊脂糖凝固之前把梳子放到凝膠澆鑄器上
*為了制作收集孔,在組裝梳子之后,輕微的向左或右一起推點樣孔和收集孔,以制作垂直
平行的孔
.
5. 在瓊脂糖凝固之后,沿垂直向上的方向取下梳子。
.
6. 移除凝膠托盤底部的凝膠刮屑。
.
7. 保持托盤里的凝膠處在與EB混合的電泳緩沖液中。
*當(dāng)凝膠從托盤里分離出時,凝膠容易破損,尤其是帶收集孔的。不要分離他們
.
8. 在使用瓊脂糖凝膠之前,把凝膠移動到另一個非EB電泳緩沖液的容器中。
然后,使用移除在點樣孔和收集孔中的凝膠刮屑。
B.電泳
.
1. 檢查極性轉(zhuǎn)換開關(guān),開關(guān)必須按到左邊。
2. 把帶凝膠的托盤放到電泳池的暗藍色部位。
3. 用電泳緩沖液填滿電泳池。
4. 在點樣孔里點樣。
5. 把帶紫外防護罩的電泳池蓋子蓋上。
6. 檢查電泳池蓋子壓下的限位開關(guān)。
7. 打開電泳開關(guān)(EP)。
8. 兩分鐘之后,打開紫外燈并檢查DNA條帶。檢查之后,關(guān)閉紫外燈。
9. 因為DNA的遷移速度受DNA尺寸和瓊脂糖濃度影響,在五分鐘或十分
鐘后再次檢查DNA條帶。
*當(dāng)紫外燈持續(xù)打開超過兩分鐘時,打開風(fēng)扇開關(guān)以防止紫外燈的熱量積累
.
10. 為了拍攝DNA條帶,把電泳池蓋子用暗室罩子替換并檢查限位開關(guān)。
*如果暗室的濾光片因蒸汽起霧,用鏡頭紙擦拭。
C.用NA 100進行DNA純化
.
載入DNA 洗提DNA 瓊脂糖凝膠
1. 瓊脂糖凝膠的準(zhǔn)備
* 如果凝膠被浸泡在TAE,TBE,或TE緩沖液與EB混合,吸空收集孔。可以使用移液器吸空
收集孔,需要非常小心。更好的辦法是使用濾紙或衛(wèi)生紙折疊成細長條,吸干收集孔。
.
2. 按照B里面1到2步驟進行。
3. 用電泳緩沖液填充電泳池,根據(jù)需要選擇0.1X到1X的TE,TAE或TBE。
緩沖液不應(yīng)該沒過瓊脂糖凝膠表面。不要過量填充。見上圖。
4. 然后,用超過15uL的1X或0.1X TE緩沖液填充進收集孔(見D.電泳緩
沖液),在PCR純化包里這也被用作通常的DNA溶解和洗提緩沖液。
5. 按照電泳部分4到9步驟進行。
6. 如果DNA收集到收集孔里,關(guān)閉EP和紫外開關(guān),取下電泳池蓋子并用移液器收集DNA。
7. 如果DNA條帶已經(jīng)超過收集孔,把極性轉(zhuǎn)換器開關(guān)按到右邊反轉(zhuǎn)電泳方向。
圖1-3:DNA遷移方式圖4:DNA收集到收集孔里
圖5和6:DNA超過了收集孔
D.電泳緩沖液
.
* 總體而言,1X TAE或TBE緩沖液被用于電泳。即使使用0.1X到0.5X TAE
或TBE代替1X緩沖液進行電泳,結(jié)果也沒有問題。這種低濃度的緩沖液延
長了設(shè)備的使用壽命,因為降低了電泳過程中的熱量和蒸汽。
* 即使使用TE緩沖液(1X TE:10mM Tris. 1mM EDTA; 0.1X TE: 1mM
Tris. 0.1mM EDTA)代替TAE或TBE進行電泳,電泳結(jié)果也沒有問題。
* 如果電泳緩沖液重復(fù)使用多次或不使用放置多日,應(yīng)該進行濃縮。
注意:高度濃縮或污染的緩沖液降低儀器的使用壽命,因為增加了電泳
過程中的熱量和蒸汽
E.加樣緩沖液
.
* 在DNA電泳中一般使用的6X加樣緩沖液為0.25%溴藍,0.25%二
甲苯藍,以及40%(w/v)蔗糖水溶液。因為加樣緩沖液染料與DNA同
方向遷移,DNA條帶變模糊。
* 紫外透射燈,NA100®的特點之一,使實時檢查DNA遷移方式成為可能。
通過使用與DNA反向遷移的加樣緩沖液,可以看到清晰的DNA條帶。推
薦使用另一種加樣緩沖液,0.05%和40%(w/v)蔗糖水溶液。
因為用NA100®可以實時的檢查DNA遷移方式,這種6X加樣緩沖液只被
用來檢查是否已經(jīng)正確加樣。
.
注意:與DNA反向遷移
.
F.NA100的使用后維護
1. 不要重復(fù)使用電泳緩沖液超過10次,不要在電泳池里放置不用超過2-3天。
濃縮的或污染的緩沖液增加了熱量和蒸汽。為了防止緩沖液的濃縮或污染,
把緩沖液移到帶蓋子的瓶中。
2. 使用NA100®之后,把透明的紫外防護罩放在電泳池上以防止電泳池或緩
沖液的蒸發(fā)或污染。
3. 把電泳池蓋子放在透明紫外防護罩上面。
4. 把暗室罩子放在電泳池蓋子上面
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