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DNA恒溫擴增試劑盒（基礎(chǔ)型）

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參考價: ￥ 1600

訂貨量: ≥1 盒

具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號WLB8201KIT

品牌EDITX

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所在地廣州市

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聯(lián)系方式：蓋作啟查看聯(lián)系方式

更新時間：2023-09-21 15:20:17瀏覽次數(shù)：153次

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  恒溫快速擴增試劑盒

DNA恒溫擴增試劑盒

DNA恒溫快速擴增試劑盒

RNA恒溫快速擴增試劑盒

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  EDITX

廣州艾迪基因科技有限責任公司

經(jīng)營模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：67條

所在地區(qū)：廣東廣州市

聯(lián)系人：蓋作啟（總經(jīng)理）

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產(chǎn)品簡介

DNA恒溫擴增試劑盒（基礎(chǔ)型）試劑盒具有靈敏度高、特異性強、反應(yīng)時間短（僅需30 min）等優(yōu)點，反應(yīng)組分為干粉狀態(tài)，操作簡便，易于保存。

詳細介紹

DNA恒溫快速擴增試劑盒（基礎(chǔ)型）使用說明書

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：DNA恒溫快速擴增試劑盒（基礎(chǔ)型）

【包裝規(guī)格】

貨號：WLB8201KIT

規(guī)格：48份/盒

【原理概述】

本試劑盒基于一種常溫恒溫核酸快速擴增技術(shù)：在常溫恒溫下，重組酶和引物形成蛋白/單鏈核苷酸的復合體Rec/ssDNA，在輔助蛋白和單鏈結(jié)合蛋白SSB的幫助下，侵入雙鏈DNA模板；在侵入位點形成D-loop區(qū)域，并開始對DNA雙鏈進行掃描；待找到與引物互補的目的區(qū)域后，復合體Rec/ssDNA解體的同時，聚合酶也結(jié)合到引物的3’末端，開始鏈的延伸。

【產(chǎn)品特點】

本試劑盒具有靈敏度高、特異性強、反應(yīng)時間短（僅需30 min）等優(yōu)點，反應(yīng)組分為干粉狀態(tài)，操作簡便，易于保存。

使用金屬浴、水浴鍋等即可進行反應(yīng)操作，無需購買PCR儀等價格高昂的設(shè)備。

【引物設(shè)計】

建議使用長度在30-35 bp的引物，引物過短會影響擴增速度和檢測靈敏度；引物設(shè)計避免形成二級結(jié)構(gòu)而影響擴增；擴增子長度建議在150-300 bp，通常不超過500 bp。

【試劑盒儲存】

1．運輸溫度：≤ 20 oC的恒溫環(huán)境；

2．儲存條件：儲存溫度 ≤ -20 °C（± 5 °C）恒溫環(huán)境，避光保存，避免重壓、反復凍融；

3．產(chǎn)品有效期：14個月；

4．生產(chǎn)日期見外包裝。

【試劑盒組成】

組成	含量
A buffer	1.6 mL×1管
B buffer	150 μL×1管
正對照模板	30 μL×1管
正對照引物Mix	60 μL×1管
試劑	48份
使用說明書	1份

【操作步驟】

提前30分鐘將試劑盒所需組分取出，室溫融化，震蕩混勻。

(1) 每個干粉反應(yīng)管加入29.4 μL A buffer（注意：A buffer需融化混勻，否則會對實驗效果產(chǎn)生影響）；

(2) 每個反應(yīng)管分別加入2 μL上游引物和2 μL下游引物（引物濃度10 μM，對于多個反應(yīng)、步驟1和步驟2可以混合后再分裝至反應(yīng)管中）；

(3) 向反應(yīng)管中依次加入2 μL ~ 14.1 μL核酸模板（可根據(jù)實際需求調(diào)整加入模板的體積，并相應(yīng)調(diào)整加入的ddH2O體積，至模板與ddH2O總體積為14.1 μL）；

(4) 最后向反應(yīng)管中加入2.5 μL B buffer并充分混合（請務(wù)必上下顛倒甩動反應(yīng)管8-10次進行混勻；對于多個反應(yīng)，建議提前將B buffer加至反應(yīng)管的蓋子內(nèi)側(cè)，蓋上蓋后上下顛倒后混勻）；

(5) 混勻后，將反應(yīng)液甩（或快速離心）至管子底部，然后盡快將反應(yīng)管放入恒溫設(shè)備中37-39 oC孵育30 min；

(6) 反應(yīng)結(jié)束后，加入Tris飽和酚/氯仿/異戊醇（25：24：1）抽提液，1:1混勻抽提反應(yīng)液，12000 rpm離心5 min，取5 μL上清進行瓊脂糖凝膠電泳檢測（瓊脂糖凝膠濃度建議為1.5%-2%）。

注：

1. 高溫變性不能有效去除蛋白，可能對產(chǎn)物分析造成影響；

2. 市場上部分擴增產(chǎn)物純化試劑盒不適用，可能造成假陰性結(jié)果。

體系配制

組分	體積（μL）
A buffer	29.4
上游引物(10 μM)*	2
下游引物(10 μM)*	2
ddH2O和DNA模板	14.1
B buffer	2.5
總體積	50

*正對照反應(yīng)單元體系配制：正對照模板加入2 μL，加入4 μL正對照引物Mix（包含上/下游引物），其他組分參照體系配制。

【注意事項】

1．由于試劑盒靈敏度非常高，在進行反應(yīng)時請注意避免核酸污染，并設(shè)置空白對照；

2．使用時請取出實驗所需的MIRA反應(yīng)單元的數(shù)量，剩余部分請置于存儲條件下。

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