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北京燕京電子有限公司
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細胞培養芯片-BE-DOUBEFLOW概述BE-DOUBLEFLOW是一種用于仿生條件下細胞培養的多功能微流控芯片
細胞培養芯片-BE-DOUBEFLOW
概述
BE-DOUBLEFLOW是一種用于仿生條件下細胞培養的多功 能微流控芯片。它允許2D-3D組織培養與建立流動和氣液界面 (ALI)的可能性相結合。仿生學微型芯片在體外復制不同的組織 結構。
典型應用實例有體外免疫系統模型，血管粥樣硬化斑塊形 成和上皮粘附等。
材質
BE-DOUBLEFLOW芯片由生物相容性材料制成，且氣體不 滲透，可以有效地梯度控制CO2、O2等。具有良好的光學性能， 具有高透明度和低自熒光。
技術特點
BE-DOUBLEFLOW芯片是由多孔膜連接的兩個通道組成。 帶有螺旋狀的進口和出口儲液池，用于連接接頭和毛細管路。 防蒸發儲液池位于培養液儲液池旁邊，培養期間，毛細管封閉 系統之前，將PBS或水灌滿防蒸發儲液池以防止蒸發。
產品經過消毒(每盒10片)。常溫(15-25℃)下，避免陽光直射，干燥處 存放。 細胞培養涂層 BE-DOUBLEFLOW芯片經過處理，表面親水，便于用水溶液和/或凝 膠填充，以促進細胞粘附。 如果需要特定包被涂層，根據廠家說明準備涂層溶液(Collagen I, Collagen IV, Fibronectin, Poly-L-Lysine, Poly-D-Lysine…)并應用到每個通道。 吸出涂層溶液，使用通道體積5-10倍的蒸餾水或PBS洗滌，去除多余的涂 層溶液。
填充和處理
1. 對細胞進行裂解和計數。細胞濃度隨細胞類型而變化。 建議在2-3天內接種細胞以獲得融合層。
2. 接種細胞。支持單分子層、水凝膠或兩者同時接種。 2A. 在膜上方的通道中接種細胞。 2B. 在膜下方接種單層細胞。將下層通道填滿細胞，并將其翻轉， 促進細胞附著。如果進行此實驗，首先在底層通道中接種細胞， 當細胞成功附著后，翻轉芯片并繼續按照協議在上面的通道中接 種細胞。 用P-100或P-1000移液管取100 μL帶細胞的培養液，加到進樣口。 培養液通過通道流到出口。注意將進口(1)填滿，將出口(2)空出， 壓力差將平衡進口和出口之間的培養液。在防蒸發儲液池中加水 或PBS以避免蒸發。
3. 細胞粘附于表面(時間因細胞類型而異)。
4. 如果不連接流體控制系統，請在培養液儲液池中添加所需的培養 液。為此，在進口旁邊的培養液儲液池中小心地添加培養液，壓 力差將平衡進口和出口之間的培養液。
5. 如果連接流體控制系統，將接頭分別接在出口和進口(按此順序)。 入口和出口設計為標準連接(UNF 1/4”- 28)。請記住，在連接設備 和毛細管之前，必須先將儲液池填充。
也可以用搖床把介質從一個儲液池移到另一個儲液池。當每個儲液池 的最終體積為100 μl時，施加45°傾角。
流體控制系統的配置
Beonchip對流體控制系統的配置提出了一些建議。 前處理: 1. 在培養箱中預熱毛細管和流體控制元件15-20分鐘。 2. 將系統放置在超凈臺中。 3. 在安裝流體控制系統之前，細胞必須良好地粘附在表面。 4. 芯片內部或入口/出口需要填充滿培養液。
組裝流體控制系統，需考慮以下事項:
1. 將入口填滿培養液，防止有氣泡殘留。
2. 在組裝系統之前，先將連接到入口的毛細管準備好。
3. 入口和出口都連接標準接頭(UNF 1/4”- 28)。當系統準備好，將接 頭連接在進口。過程中必須非常小心，以確保沒有氣泡進入系統。
4. 將毛細管連接到出口，封閉系統。
5. 檢查系統是否有泄漏。在將系統放入生物反應柜或培養箱之前， 讓泵運行幾分鐘。
注意：為防止過程中產生氣泡，請避免將移液管倒空。當從吸液口移開 移液管時，緊緊握住柱塞，以免負壓將溶液吸走。
細胞接種
下面是應用實例，以便更好地理解該芯片。 芯片可以進行單培養或共培養。在膜上和/或下接種不同類型的細胞 單分子層(1)。為了更實際的分析，可以在膜上添加水凝膠細胞培養物(3)。
細胞顯微觀察的準備
可監測固定的或活的細胞和化學梯度。傳統細胞培養中使用的大多數 監測系統都可以用于BEONCHIP微流控芯片。常用的固定物也可用。細胞活力可以用不同的染料來評估。此外，免疫熒光染色可識別特異性靶點。 細胞周期熒光記錄儀也可以使用。
其他讀數
可以復蘇細胞，以便進行下游應用，如流式細胞，RNA提取(PCR)… 欲了解更多信息，請聯系BEC
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