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細(xì)胞培養(yǎng)芯片-BE-DOUBEFLOW

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更新時間：2024-05-27 10:05:52瀏覽次數(shù)：193次

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產(chǎn)品簡介

細(xì)胞培養(yǎng)芯片-BE-DOUBEFLOW概述BE-DOUBLEFLOW是一種用于仿生條件下細(xì)胞培養(yǎng)的多功能微流控芯片

詳細(xì)介紹

細(xì)胞培養(yǎng)芯片-BE-DOUBEFLOW

概述

BE-DOUBLEFLOW是一種用于仿生條件下細(xì)胞培養(yǎng)的多功能微流控芯片。它允許2D-3D組織培養(yǎng)與建立流動和氣液界面 (ALI)的可能性相結(jié)合。仿生學(xué)微型芯片在體外復(fù)制不同的組織結(jié)構(gòu)。

典型應(yīng)用實例有體外免疫系統(tǒng)模型，血管粥樣硬化斑塊形成和上皮粘附等。

材質(zhì)

BE-DOUBLEFLOW芯片由生物相容性材料制成，且氣體不滲透，可以有效地梯度控制CO2、O2等。具有良好的光學(xué)性能，具有高透明度和低自熒光。

技術(shù)特點

BE-DOUBLEFLOW芯片是由多孔膜連接的兩個通道組成。帶有螺旋狀的進(jìn)口和出口儲液池，用于連接接頭和毛細(xì)管路。防蒸發(fā)儲液池位于培養(yǎng)液儲液池旁邊，培養(yǎng)期間，毛細(xì)管封閉系統(tǒng)之前，將PBS或水灌滿防蒸發(fā)儲液池以防止蒸發(fā)。

產(chǎn)品經(jīng)過消毒(每盒10片)。常溫(15-25℃)下，避免陽光直射，干燥處存放。細(xì)胞培養(yǎng)涂層 BE-DOUBLEFLOW芯片經(jīng)過處理，表面親水，便于用水溶液和/或凝膠填充，以促進(jìn)細(xì)胞粘附。如果需要特定包被涂層，根據(jù)廠家說明準(zhǔn)備涂層溶液(Collagen I, Collagen IV, Fibronectin, Poly-L-Lysine, Poly-D-Lysine…)并應(yīng)用到每個通道。吸出涂層溶液，使用通道體積5-10倍的蒸餾水或PBS洗滌，去除多余的涂層溶液。

填充和處理

1. 對細(xì)胞進(jìn)行裂解和計數(shù)。細(xì)胞濃度隨細(xì)胞類型而變化。建議在2-3天內(nèi)接種細(xì)胞以獲得融合層。

2. 接種細(xì)胞。支持單分子層、水凝膠或兩者同時接種。 2A. 在膜上方的通道中接種細(xì)胞。 2B. 在膜下方接種單層細(xì)胞。將下層通道填滿細(xì)胞，并將其翻轉(zhuǎn)，促進(jìn)細(xì)胞附著。如果進(jìn)行此實驗，首先在底層通道中接種細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞成功附著后，翻轉(zhuǎn)芯片并繼續(xù)按照協(xié)議在上面的通道中接種細(xì)胞。用P-100或P-1000移液管取100 μL帶細(xì)胞的培養(yǎng)液，加到進(jìn)樣口。培養(yǎng)液通過通道流到出口。注意將進(jìn)口(1)填滿，將出口(2)空出，壓力差將平衡進(jìn)口和出口之間的培養(yǎng)液。在防蒸發(fā)儲液池中加水或PBS以避免蒸發(fā)。

3. 細(xì)胞粘附于表面(時間因細(xì)胞類型而異)。

4. 如果不連接流體控制系統(tǒng)，請在培養(yǎng)液儲液池中添加所需的培養(yǎng) 液。為此，在進(jìn)口旁邊的培養(yǎng)液儲液池中小心地添加培養(yǎng)液，壓力差將平衡進(jìn)口和出口之間的培養(yǎng)液。

5. 如果連接流體控制系統(tǒng)，將接頭分別接在出口和進(jìn)口(按此順序)。入口和出口設(shè)計為標(biāo)準(zhǔn)連接(UNF 1/4”- 28)。請記住，在連接設(shè)備和毛細(xì)管之前，必須先將儲液池填充。

也可以用搖床把介質(zhì)從一個儲液池移到另一個儲液池。當(dāng)每個儲液池的最終體積為100 μl時，施加45°傾角。

流體控制系統(tǒng)的配置

Beonchip對流體控制系統(tǒng)的配置提出了一些建議。前處理: 1. 在培養(yǎng)箱中預(yù)熱毛細(xì)管和流體控制元件15-20分鐘。 2. 將系統(tǒng)放置在超凈臺中。 3. 在安裝流體控制系統(tǒng)之前，細(xì)胞必須良好地粘附在表面。 4. 芯片內(nèi)部或入口/出口需要填充滿培養(yǎng)液。

組裝流體控制系統(tǒng)，需考慮以下事項:

1. 將入口填滿培養(yǎng)液，防止有氣泡殘留。

2. 在組裝系統(tǒng)之前，先將連接到入口的毛細(xì)管準(zhǔn)備好。

3. 入口和出口都連接標(biāo)準(zhǔn)接頭(UNF 1/4”- 28)。當(dāng)系統(tǒng)準(zhǔn)備好，將接頭連接在進(jìn)口。過程中必須非常小心，以確保沒有氣泡進(jìn)入系統(tǒng)。

4. 將毛細(xì)管連接到出口，封閉系統(tǒng)。

5. 檢查系統(tǒng)是否有泄漏。在將系統(tǒng)放入生物反應(yīng)柜或培養(yǎng)箱之前，讓泵運行幾分鐘。

注意：為防止過程中產(chǎn)生氣泡，請避免將移液管倒空。當(dāng)從吸液口移開移液管時，緊緊握住柱塞，以免負(fù)壓將溶液吸走。

細(xì)胞接種

下面是應(yīng)用實例，以便更好地理解該芯片。芯片可以進(jìn)行單培養(yǎng)或共培養(yǎng)。在膜上和/或下接種不同類型的細(xì)胞單分子層(1)。為了更實際的分析，可以在膜上添加水凝膠細(xì)胞培養(yǎng)物(3)。

細(xì)胞顯微觀察的準(zhǔn)備

可監(jiān)測固定的或活的細(xì)胞和化學(xué)梯度。傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)中使用的大多數(shù) 監(jiān)測系統(tǒng)都可以用于BEONCHIP微流控芯片。常用的固定物也可用。細(xì)胞活力可以用不同的染料來評估。此外，免疫熒光染色可識別特異性靶點。細(xì)胞周期熒光記錄儀也可以使用。

其他讀數(shù)

可以復(fù)蘇細(xì)胞，以便進(jìn)行下游應(yīng)用，如流式細(xì)胞，RNA提取(PCR)… 欲了解更多信息，請聯(lián)系BEC