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深圳市恒昊生物科技有限公司
布氏桿菌抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)
使 用 說 明(96T/48T)
布氏桿菌抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)
使 用 說 明(96T/48T)
[原理]
[試劑盒組成]
1、化抗原預包被板 1塊(8X12/4X12)
2、陰性對照 1瓶
3、陽性對照 1瓶
4、標本稀釋液 1瓶(20/10 ml,直接使用)
5、酶結合物 1瓶(12/5ml,直接使用)
6、30X濃縮洗液
1瓶(20/10ml,加蒸餾水1:30稀釋使用)
7、顯示劑A、B液 各1瓶(5/3ml)
8、終止液(2M H2SO4) 1瓶(5/3ml)
9、說明書 1份
[操作步驟]
1. 將試劑盒平衡至室溫后取出反應板拆封后置于 板架上。
2. 加樣:用標本稀釋液以1:41(5ul—200ul)稀釋待檢血清標本后,取100ul加入到反應板孔中,分別加陰陽性對照各100ul于反應板中,并設空白對照一孔(加100ul標本稀釋液)。
3. 37℃溫育30分鐘。甩去孔內液體,用洗滌液洗板3次并在吸水紙上拍干。
4. 加酶結合物:每孔2滴(或100ul),混勻后置37℃溫育30分鐘。同上法洗滌3次并拍干。
5. 顯色:每孔加顯色劑A、B各1滴(或50ul),輕拍混勻(或震蕩器混勻)后置37℃10分鐘。
[結果判斷]
1. 目測:在白色背景下觀察各孔顯色情況,蘭色者為陽性,無色者為陰性。
2. 酶標儀測定:每孔加終止液一滴,混勻后在450nm下測定各孔O.D值。
S/N=標本O.D值/ 陰性對照O.D值。
S/N≥2.1為陽性;
1.5≤S/N<2.1為可疑標本; S/N<1.5為陰 性。
④ 陰性對照(NC)小于0.10時以0.10計, 大于0.1小于0.21時以實際O.D值計算;若大于0.21時,實驗可能出現了較大誤差,需重復實驗。
⑤ 陽性對照(PC)值通常≥0.4,實驗成立,否則需重做。
[注意事項]
1. 微孔板須密封防潮,從冷藏環境中取出時,應置室溫平衡至潮氣盡干后方可開啟使用,余者封存置2-8℃。
2. 滴加試劑前應將液體翻轉數次混勻,滴加時保持瓶身垂直。
3. 洗滌時每孔均須加滿,防止孔內有游離酶不能洗凈。
4. 試劑置2-8℃存放,不能凍結,有效期10個月。
5. 避免用溶血、混濁或脂血標本。
6. 用新鮮標本,如需保存,可于2-8℃冷藏48小時或-20℃凍存4周(樣本應避光)。
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