乙型腦炎病毒抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）
使 用 說 明（96T/48T）
[原理]
流行性乙型腦炎是由嗜神經的乙腦病毒所致的中樞神經系統性傳染病。經蚊等吸血昆蟲傳播，流行于夏秋季，多發生于兒童，臨床上以高熱、意識障礙、驚厥、呼吸衰竭及腦膜刺激征為特征。部分患者留有嚴重后遺癥，重癥患者病死率較高。
本試劑盒采用間接ELISA法，以純化流行性乙型腦炎病毒抗原包被，配以抗人IgM單克隆抗體酶結合物等試劑組成。本試劑盒操作快速、簡便，取微量全血即可檢測，適用于計劃免疫效果監測和人群抗體水平調查。
[試劑盒組成]
1、化EEB抗原預包被板 1塊（8X12/4X12）
2、陰性對照 1瓶
3、陽性對照 1瓶
4、標本稀釋液 1瓶（22/11 ml，直接使用）
5、酶結合物 1瓶（12/5ml，直接使用）
6、30X濃縮洗液
1瓶（20/10ml，加蒸餾水1：30稀釋使用）
7、顯示劑A、B液 各1瓶（5/3ml）
8、終止液（2M H2SO4） 1瓶（5/3ml）
9、說明書 1份
[操作步驟]
1、樣本稀釋：用標本稀釋液以1：41（5ul—200ul）稀釋標本，混勻后置37℃20分鐘。
2、加樣：小心吸取已稀釋待檢標本上清液100ul于反應孔中，設陰、陽性對照（各100ul）及空白對照（加100ul標本稀釋液）各一孔。輕拍混勻。37℃溫育30分鐘。甩去孔內液體，用洗滌液洗板3次并在吸水紙上拍干。
3、加酶結合物：每孔2滴，混勻后置37℃溫育30分鐘。同上法洗滌3次并拍干。
4、 顯色：每孔加顯色劑A、B各一滴，輕拍混勻（或震蕩器混勻）后置37℃10分鐘。
[結果判斷]
1. 目測：在白色背景下觀察各孔顯色情況，蘭色者為陽性，無色者為陰性。
2. 酶標儀測定：每孔加終止液1滴（或50ul），混勻后在450nm下測定各孔O.D值。
S/N=標本O.D值/ 陰性對照O.D值。
S/N≥2.1為陽性；
1.5≤S/N<2.1為可疑標本; S/N<1.5為陰性。
④ 陰性對照(NC)小于0.10時以0.10計, 大于0.1小于0.21時以實際O.D值計算;若大于0.21時,實驗可能出現了較大誤差,需重復實驗。
⑤ 陽性對照(PC)值通常≥0.4,實驗成立,否則需重做。
[注意事項]
1. 微孔板須密封防潮，從冷藏環境中取出時，應置室溫平衡至潮氣盡干后方可開啟使用，余者封存置2-8℃。
2. 滴加試劑前應將液體翻轉數次混勻，滴加時保持瓶身垂直。
3. 洗滌時每孔均須加滿，防止孔內有游離酶不能洗凈。
4. 試劑置2-8℃存放，不能凍結，有效期10個月。
5. 避免用溶血、混濁或脂血標本。
6. 好用新鮮標本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小時或-20℃凍存4周（樣本應避光）。
