人乳頭瘤病毒 抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）
使 用 說 明（96T/48T）
[原理]
本試劑盒采用親和素-素化 HPV 衣殼蛋白 L1 抗原預包被板 ELISA 原理，檢測人血清/血漿中存在的 HPV-IgM 抗體，并配以酶標記抗人 IgM u 鏈單克隆抗體 作為標記物。加入底物 TMB 顯色后終止反應，在 450nm 波長測各孔 O.D 值，O.D 值的大小與待檢抗體含量成正 比。素系統（biotin-avidin system）的穩固級聯放大 作用，使試劑的特異性、靈敏度、穩定性極大地提高； 另外，血清/血漿經預吸收后非特異性因素（如 RF 因子 和變性或聚合的人 IgM）的影響被底消除，經驗證其 結果全等同于 capture-ELISA,為本試劑盒之特點。
[用途]
本試劑盒用于定性檢測人血清/血漿中的 HPV-IgM 抗體。
[試劑盒組成]
1 素化抗原預包被板 1 塊（8X12/4X12）
2 、陰性對照血清 1 瓶
3 、陽性對照血清 1 瓶
4 、標本稀釋液 1 瓶（20 ml/10ml ，直接使用）
5 、酶結合物 1 瓶（10/5ml ，直接使用）
6 、30X 濃縮洗液
1 瓶（20/10ml ，加蒸餾水 1 ：30 稀釋使用）
7 、顯示劑 A 、B 液 各 1 瓶（5/2.5ml）
8 、終止液（2M H2SO4 ） 1 瓶（5/2.5ml）
9 、說明書 1 份
[操作步驟]
1. 將試劑盒平衡至室溫后取出反應板拆封后置于板架 上。
2. 樣本稀釋：用標本稀釋液以 1 ：101（2ul—200ul）稀 釋標本（不留吸嘴），混勻后吸取 100ul 上清液加 入到各反應孔（或每孔加 200ul 標本稀釋液，再分 別加入 2ul 標本于相應孔中，震蕩或輕拍混勻）。 設陰、陽性對照（各 100ul）及空白對照（加 100ul 標本稀釋液）各一孔。輕拍混勻。
3. 37℃溫育 30 分鐘。甩去孔內液體，用洗滌液洗板 3 次并在吸水紙上拍干。
4. 加酶結合物：每孔 2 滴（或 100ul），混勻后置 37℃ 溫育 30 分鐘。同上法洗滌 3 次并拍干。
5. 顯色：每孔加顯色劑 A、B 各 1 滴（或 50ul），輕拍 混勻（或震蕩器混勻）后置 37℃10 分鐘。
[結果判斷]
1. 目測：在白色背景下觀察各孔顯色情況，蘭色者為 陽性，無色者為陰性。
2. 酶標儀測定：每孔加終止液 1 滴（或 50ul），混勻后 在 450nm 下測定各孔 O.D 值。
（1）P/N=標本 O.D 值/ 陰性對照 O.D 值。
（2）P/N≥2. 1 為陽性；
（3）1.5≤P/N<2. 1 為可疑標本; P/N<1.5 為陰性。
（4）陰性對照(NC)小于 0.10 時以 0.10 計, 大于 0.1 小于 0.21 時以實際 O.D 值計算 ;若大于 0.21 時, 實驗可能出現了較大誤差,需重復實驗。
（5）陽性對照(PC)值通常≥0.4,實驗成立,否則需重 做。
[注意事項]
1. 微孔板須密封防潮，從冷藏環境中取出時，應置室溫 平衡至潮氣盡干后方可開啟使用，余者封存置2-8℃。
2. 滴加試劑前應將液體翻轉數次混勻，滴加時保持瓶身 垂直。
3. 洗滌時每孔均須加滿，防止孔內有游離酶不能洗凈。
4. 試劑置 2-8℃存放，不能凍結，有效期 10 個月。
5. 避免用溶血、混濁或脂血標本。
6. 用新鮮標本，如需保存，可于 2-8℃冷藏 48 小時 或-20℃凍存 4 周（樣本應避光）。
