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上海科興商貿有限公司
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閱讀:294發布時間:2016-1-18
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
1.保存血清的方法
建議血清應保存在-5℃至-2O℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。
2.如何解凍血清才不會使產品品質受損
將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規則地搖晃均勻。
3.血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現,該如何處理
血清中沉淀物的出現有許多種原因,但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的品質。
欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內離心,上清液即可接著加入培養基內一起過濾。不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。
4.為什么要熱滅活血清
加熱可以滅活補體系統。啟動的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,啟動淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,培養ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。
5.有必要做熱滅活嗎
實驗顯示,經過正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的品質,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,如同“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。因此,除非必須,盡可能不需要做熱處理這一步。
6.為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現沉淀
儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應該不會影響血清的品質。建議在-20℃儲存胎牛血清,避免反復凍融。
7.如何避免沉淀物的產生
解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。 解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。 請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害,而影響血清的品質。 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
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