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閱讀:889發(fā)布時間:2011-8-4
*原料藥-*-液相色譜法,本方法采用液相色譜法測定*原料藥中*的含量。
方法原理:供試品加磷酸鹽緩沖液溶解再加流動相稀釋,進入液相色譜儀進行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長254nm處檢測*的峰面積,計算出其含量。
試劑:1. 乙腈,2. 甲醇:3. 0.25%四甲基氫氧化銨溶液。4. 磷酸,5. 乙二胺四醋酸二鈉溶液(0.1mol/L),6. pH7.0磷酸鹽緩沖液 。
*分析實驗儀器設備:
1. 儀器1.1 液相色譜儀,1.2 色譜柱:十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論塔板數(shù)按*峰計算應不低于2000。1.3 紫外吸收檢測器。
2. 色譜條件。2.1 流動相:0.25%四甲基氫氧化銨溶液(用磷酸調節(jié)pH值為5.5) 乙腈 甲醇=900 60 40,加入0.1mol/L乙二胺四醋酸二鈉溶液0.4mL 。2.2 檢測波長:254nm 。2.3 柱溫:室溫
試樣制備:1. pH7.0磷酸鹽緩沖液。稱取無水*42.59g、磷酸二氫鉀27.22g,加水溶解并稀釋至1000mL。2. 對照品溶液的制備:精密稱取*對照品約20mg,置100mL棕色量瓶中,加磷酸鹽緩沖液(pH7.0)溶解后用流動相稀釋至刻度,搖勻,即為對照品溶液。3.供試品溶液的制備:精密稱取供試品約20mg,置100mL棕色量瓶中,加磷酸鹽緩沖液(pH7.0)溶解后用流動相稀釋至刻度,搖勻,即為供試品溶液。
注:“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。
操作步驟:分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL,注入液相色譜儀,用紫外吸收檢測器于波長254nm處測定*(C14H13N5O5S2)的峰面積,計算出其含量
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