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閱讀:1047發布時間:2014-8-14
振蕩與培養基密封培養法
振蕩培養法
將試管或瓶子中的固體培養基熔化后接種,再使之凝固。所用的zui簡單的培養基是加人1%葡萄糖的營養瓊脂。
(1)將培養基液化,并在100℃保持10min以去掉所有溶解的氧,冷卻至45℃,立即使用。
(2)加入接種物,用手旋轉試管使試管內容物*混合,并注意不要產生氣泡。
(3)將試管放入冷水中以使瓊脂凝固。
(4)在所需的溫度下培養。
因為氧穿透固體培養基的速度很慢,因此試管的底部很適合于厭氧菌的生長,這種方法對于微需氧菌和兼性厭氧菌也很適用。
培養基密封培養法
使用無菌的密封物質可以無菌地保存液體培養基。含有液體培養基的試管應在沸水浴中加熱10min以驅除溶解的氧,然后加入已滅菌的液態凡士林或石蠟密封以隔絕空氣。 接種時可將凡士林熔化,用毛細吸管吸取菌液接種(或者是將試管加熱,冷卻后立即接種,然后再用無菌的密封物質密封I
通過快速凝結反應,該方法可用來證明水或牛乳中的產氣莢膜梭狀芽孢桿菌,所用的 培養基是無氧的滅菌牛乳,按上述方法進行密封。
Vaspar是一種非常有用的密封物質,它是將凡士林和石蠟以相同的比例混合熔融后制成。在培養基中加人熔化的Vaspar并使其固化后,用火焰慢慢地加熱試管的
Vaspar部分,使固化的Vaspar重新熔化并與試管壁緊密粘連以隔絕接觸面的空氣。滅菌 的石蠟也能起到培養基密封的作用,但它不能檢測氣體的產生,而且會冇一些氧穿過液體石蠟密封層而溶解到培養基中。
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