對于絕大多數實驗室培養的用作模型的細胞來說，細胞傳代是一項*的工作，常用的傳代方法為：向長滿了細胞的培養瓶中加入足量胰酶浸泡消化細胞一段時間后再分散細胞并傳代。但是各種細胞對胰酶的敏感度千差萬別，有的細胞比如HEK293系列的極容易消化，而有些如RAW264.7幾乎不能被胰酶從瓶壁上消化下來。消化時間不夠，后續的細胞分散就需要用機械力，這樣對細胞損傷太大，而且往往達不到很好的效果；消化過度，則會引起某些敏感的細胞的死亡，對于廣大新手來說，在培養細胞時胰酶的消化程度很難把握。

方法改進：

1. 胰酶消化：細胞長滿后，棄培養基，用無菌PBS或者0.25%的胰酶溶液適量浸洗細胞一次，浸洗的目的是去除生活藏培養基中的血清等抑制胰酶活性的物質，洗完后棄凈洗液，再次用0.25%的胰酶溶液潤洗一次，洗完后小心丟棄洗液，此時瓶內還會殘留很少的胰酶溶液，蓋好細胞瓶塞，放入培養箱進行消化直到對光可見明顯的細胞間隙增大，瓶內變圓細胞開始整體脫落，此時加入生長培養基終止消化，后續輕微用移液器吹打即可很好的分散細胞。

2. 有些實驗室采用添加EDTA的方法增加胰酶的消化能力，但是添加的EDTA會大量螯合體系中的二價離子，如Ca2+，如此會導致細胞尤為環境及胞內離子的大量流失，容易對細胞照成更大的損傷。因此，本人改進的方法中不使用添加EDTA的胰酶消化液。

3. 對于本身貼壁不牢但是又容易聚集生長的細胞，典型的例子就是HEK293,方法可以改進為：采用上述殘液消化，但是在放入37度培養箱消化時培養瓶倒置，適當延長消化時間（HEK293:5-8min）；因為無論是直接倒出還是用吸管吸，培養瓶內殘留的胰酶還是很多，這類細胞極易從瓶壁上大塊脫落后，在胰酶溶液里面形成團狀，極難被消化分散。

4. 對RAW264.7這類極難用胰酶消化的細胞，可采用的改進方法如下：第二次用胰酶浸洗時延長時間至5-10min，之后倒出胰酶，剩余殘液繼續放回培養箱中進行消化10-15min，此時細胞可很容易的被吹打分散均勻。