實(shí)驗(yàn)中之顯色異常

時(shí)間：2022-5-10閱讀：288

固相載體在ELISA試劑盒測(cè)定過程中作為吸附劑和容器，不參與化學(xué)反應(yīng)。可作ELISA試劑盒中載體的材料很多，聚苯乙烯具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能，抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后仍保留原來的免疫學(xué)活性，加之它的價(jià)格低廉，所以被普遍采用。

聚苯乙烯為塑料，可制成各種形式。此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。在一定時(shí)間內(nèi)，陰性孔可保持無色，而陽性孔則---間的延長而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行。在定量測(cè)定中，加入底物后的反應(yīng)溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。

定性測(cè)定的顯色可在室溫進(jìn)行，時(shí)間一般不需要嚴(yán)格控制，有時(shí)可根據(jù)陽性對(duì)照孔和陰性對(duì)照孔的顯seqing況適當(dāng)縮短或延長反應(yīng)時(shí)間，及時(shí)判斷。

技術(shù)答復(fù)可能原因如下：

（1）水質(zhì)被金屬離子等污染；防止辦法盡量使用新鮮水或蒸餾水。

（2）洗滌不充分，樣品中其它成分殘留或酶殘留；防止辦法洗滌液應(yīng)注滿微孔，充分洗滌。

（3）移液頭重復(fù)使用，未洗凈或消毒不*；一次性使用。

（4）酶標(biāo)板靈敏度過高。

（5）一抗顯色時(shí)間的控制等等，關(guān)于ELISA試劑盒的每一步都要注意才行。

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