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大鼠氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)elisa檢測試劑盒 ,英文名:Rat Oxidized low density lipoprotein, Ox-LDL ELISA Kit
產品簡單說明:OxLDL, 氧化型低密度脂蛋白(Oxidized low density lipoprotein, Ox-LDL ) ,低密度脂蛋白(LDL)經氧化修飾形成的脂蛋白,稱為氧化低密度脂蛋白(OxLDL)。LDL可能經歷兩種形式的修飾-衍化(MAD粘附于ApoB-100或者ApoB-100的糖基化)、氧化(ApoB-100被過氧化物降解),分別形成衍化的LDL和氧化的LDL。LDL核心的脂肪酸中含有大量不飽和脂肪酸olyunsaturated fatty acids,PUFAs)約占LDL總脂肪酸含量的35%~70%,所以容易發生自身氧化。LDL中的PUFAs在自由基或其他氧化劑作用下,生成脂類自由基,并能產生多的過氧化脂質,引起連鎖的自由基鏈式反應,zui終生成多種反應性的醛。
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ELISA的比色測定由酶標儀進行。有的同行可能會認為,既然由酶標儀進行,那么此時便可以萬事大吉了,其實不然,因為當代較為先進的酶標儀,均有較多的功能,使用不當,會得到令人難以理解的大鼠氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)elisa檢測試劑盒 實驗結果。如使用酶標儀比色測定后,有許多的陰性測定孑L的吸光度值為負數;或測定假陽性率大大增加等等。這主要是沒有正確地理解和使用酶標儀所致。
此外,在加入底物開始顯色反應前,是先檢查一下底物溶液的有效性,即可將A和B兩種液各加1滴于清潔的空板孔或eppendorf管中,觀察是否有顯色出現,如有,則說明底物已變質。以OPD為底物,配好后應為五色,否則就不能使用。以TMB為底物,整個顯色反應過程無需避光,而以OPD為底物,則需避光進行。關于TMB和OPD的顯色反應特點及注意點可參考前面有關章節內容。顯色反應完成后,加入酸終止反應,振蕩混勻后即可進行下面的比色測定或肉眼判斷結果。
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在目前的以HRP作為標記酶的商品市場ELISA試劑盒中,如以TMB為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以OPD為底物,則試劑盒提供OPD片劑或粉劑,臨用前配制。一般商品大鼠氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)elisa檢測試劑盒 顯色反應條件為37℃或室溫反應15~30min。從理論上說,37℃30min才可以使HRP的底物催化反應*,盡管在zui初的10min內,絕大部分催化反應即可完成。因此,為使弱陽性樣本孔能有充分的顯色,建議在37℃下反應25~30min后,終止反應比色測定。
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