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考馬斯亮藍染色中G250與R250的區別

2017-3-1  閱讀(1340)

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R250屬于慢染,脫色脫的*,G250屬于快染,脫色脫的不*

R250(Coomassie brilliant blue R250).C45H44O7H3S2Na,MW=824,λmax=560―590nm.染色靈敏度比氨基黑高5倍.尤其適用于SDS電泳微量蛋白質染色.但蛋白質濃度超出一定范圍時,對高濃度蛋白的染色不符合Beer定律,用作定量分析時要注意這點.


G250, 又名Xylene brilliant cyaninG.比考馬斯亮藍R250多二個甲基.MW=854;λmax=590―610nm.染色靈敏度不如R250,但比氨基黑高3倍.優點在于它在三lv乙酸中不溶而成膠體,能選擇地染色蛋白而幾乎無本底色.所以常用于需要重復性好和穩定的染色,適于作定量分析.

G250中的G就是Green,偏綠,R250中的R代表Red,偏紅,在進行小分子量蛋白的Tricine電泳是常用G250染色,至于加熱,染和脫色都可以加熱,但都是在急需知道結果的情況下采用,加熱后染的背景色很重脫色時間就長而且很難將背景色脫干凈,脫色液經常加熱會導致固定劑的會發,很快脫色劑就沒用了,脫色效果很差,而且加熱揮發出來的甲醛對呼吸道有刺激作用因此盡量不要加熱!

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