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維生素K1
食品衛生檢驗培養基
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抗體的親和力 :
是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小、抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩定的分子間力有氫鍵、疏水鍵、側鏈相反電荷基因的庫侖力、范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示,K的單位是L/mol,通常K的范圍在 108 ~1010 /mol,也有多達 1014 /mol。抗體親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
生物活性:
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發揮中和病毒的作用。
(2)激活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,產生不同的疚,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺激機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
(7)通過與細胞Fc受體結合發揮多種生物效應 ①調理作用 IgG、IgM的Fc段與吞噬細胞表面的FcγR、FcμR結合,增強其吞噬能力,通常將抗體促進吞噬細胞吞噬功能的作用稱為抗體的調理作用 (opsonization)。 ②發揮抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用。
按理化性質和生物學功能分類:
按理化性質和生物學功能,可將其分為IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五類。
IgM抗體是免疫應答中首先分泌的抗體。它們在與抗原結合后啟動補體的級聯反應。它們還把入侵者相互連接起來,聚成一堆便于巨噬細胞的吞噬;
IgG抗體激活補體,中和多種毒素。IgG持續的時間長,是*能在母親妊娠期穿過胎盤保護胎兒的抗體。他們還從乳腺分泌進入初乳,使新生兒得到保護;
IgA抗體進入身體的黏膜表面,包括呼吸、消化、生殖等管道的黏膜,中和感染因子。還可以通過母乳的初乳把這種抗體輸送到新生兒的消化道黏膜中,是在母乳中含量zui多,zui為重要的一類抗體;
IgE抗體的尾部與嗜堿細胞、肥大細胞的細胞膜結合。當抗體與抗原結合后,嗜堿細胞與肥大細胞釋放組織胺一類物質促進炎癥的發展。這也是引發速發型過敏反應的抗體;
IgD抗體的作用還不太清楚。它們主要出現在成熟的B淋巴細胞表面上,可能與B細胞的分化有關。
(IgD于1995年從人骨髓瘤蛋白中發現,分子量為175kD,主要由扁桃體、脾等處漿細胞產生,人血清中IgD濃度為3~40μg/ml,不到血清總Ig的1%,在個體發育中合成較晚。IgD鉸鏈區很長,且對蛋白酶水解敏感,因此IgD半衰期很短,僅2.8天。血清中IgD確切的免疫功能尚不清楚。在B細胞分化到成熟B細胞階段,除了表達SmIgD,抗原刺激后表現為免疫耐受。成熟B細胞活化后或者活化后或者變成記憶B細胞時,SmIgD逐漸消失。)
單克隆抗體:
(monoclonal antibody,McAb)克隆選擇學說:淋巴細胞在與抗原接觸前就已經存在多種多樣的與抗原專一性結合的受體,一種細胞帶一種受體,進入機體的抗原選擇性的結合其中的個別淋巴細胞,使之活化,增殖產生大量帶有同樣受體的細胞群,分泌同樣的抗體。當抗原進入體內,在機體中就會誘導出針對不同抗原決定簇的多種抗體,如果要把這些抗體一一分開,用現有的生物化學或物理化學方法是根本辦不到的。1975年科勒(Kohler)和米爾斯坦(Milstein)將小鼠免疫細胞與腫瘤細胞融合,培養出既能迅速生長無限繁殖又可分泌特異性抗體的雜交瘤細胞。從而獲得針對某一特殊抗原決定簇的單克隆抗體。1995年,Katherine Knight博士在美國芝加哥Loyola大學成功地從轉基因兔中獲得了骨髓瘤細胞(Plasmacytoma),開創了兔單克隆抗體技術。與鼠單抗相比,兔單抗具有:首先,兔抗血清通常含有高親和力抗體,可以比鼠抗血清識別更多種類的表位;其次,兔單克隆抗體能夠識別許多在小鼠中不產生免疫的抗原;第三,由于兔脾臟較大,可以更多進行的融合試驗,使得高通量篩選融合成為可能。
標記抗體:
抗體經過酶標記、鐵蛋白標記或通過膠體金標記獲得標記抗體,是免疫電鏡樣品制備的一種方法,用于觀察抗原抗體免疫復合物方面研究的手段。
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