產品名稱：Phospho-Bcl-2(Ser70) 磷酸化Bcl-2抗體
品牌：進口/國產
貨號：BY-3052R
規格：咨詢
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方法二 用于檢測未知抗體的間接法： 用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml， 每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。二抗是利用抗體是大分子的蛋白質具有抗原性的性質，去免疫異種動物，由異種動物的免疫系統產生的針對于此抗體的免疫球蛋白。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔 中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照) ↓ 于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml， 37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。(4) 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應，而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。抗血清收獲后，加 1/萬硫柳汞或 1/萬的疊氮鈉防腐，或加入等量的中性甘油，分裝小瓶，置-20℃以下的低溫保存，數月至數年內抗體效價無明顯變化。注意避免反復凍融。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線，計算各自的結合率，求出各自在 IC50時的濃度，并按下列公式計算交叉反應率。