如果陰性對照沒有染色而陽性對照標(biāo)本弱陽性，除了考慮上述因素外，還應(yīng)考慮：

  ① 標(biāo)本的固定方式，不當(dāng)?shù)墓潭ǚ绞交蚬潭〞r溫度過高，都會影響到所檢測的抗原的數(shù)量和質(zhì)量。

   ② 不適當(dāng)?shù)目乖迯?fù)方式，由于石蠟切片在制作的過程中固定劑對抗原的封閉作用，必須用抗原熱修復(fù)或酶消化或兩種同時使用的抗原雙暴露法，至于使用哪一種方法，應(yīng)參照的說明，同時結(jié)合標(biāo)本的具體情況而定。ELISA試劑盒

   ③ 抗體的稀釋度是否過高或者孵育的溫度/時間是否正確。一般試劑都會對試劑給出一定的使用范圍，但是由于使用者的標(biāo)本來自各種組織，處理過程也不盡相同，所以應(yīng)參照使用范圍，對所使用的一抗進行梯度測試，找出的使用濃度。

   ④ 切片上了過多的沖洗液，當(dāng)抗體加至切片上時，等于人ELISA試劑盒為地對抗體進行了進一步的稀釋。

   ⑤ 孵育時切片是否放置水平，否則會導(dǎo)致抗體流失。

  如果陰性對照沒有反應(yīng)，陽性對照反應(yīng)良好，而標(biāo)本弱陽性，則可能是由于陽性對照不是同一種組織、或固定方式不同等原因所致。