試劑抗干擾作用的合理性
有些液體雙試劑，其實質并不真正具備抗干擾的能力而只是解決了試劑的液體化和穩定性問題。如，ALT試劑盒中，NADH在pH7.5~7.8水溶液中極不穩定，在pH>8.7時才能穩定保存。因此，為了保證試劑穩定性，液體雙試劑的R1需要維持pH>8.7，但此時LDH活性大大下降，就失去消除內源性丙酮酸的功能，只有加入試劑R2后，反應混合液的pH下降至LDHzui適pH，在經過延遲時間60 S后，才能消除內源性丙酮酸的干擾。再如，Tfinder反應中抗Vc干擾問題：由于維生素c易氧化，樣品中Vc會競爭反應生成的過氧化氫，而產生負干擾。因此，在試劑R1中加入抗壞血酸氧化酶，這種方法是有效的，但不一定有很大的意義。因為Vc干擾必須同時具備二個條件：a)Vc攝入量較多；b)采血后立即測定。實驗表明離體血清中Vc在90 min后會全部被氧化。又如，使用胺類新色原。a)分子共軛結構特性使得靈敏度提高，相應可以減少樣本用量，zui終能有效地降低干擾物的量．b)使生成胺類色素原zui大吸收峰由500~520 nm移至550 nm以上，以避開黃疸、溶血干擾。如：亞鐵一H 0 ，能有效避免黃疸干擾的理論依據是亞鐵與H。0。親和力遠遠大于膽紅素。甘油三酯測定，有人主張選用雙試劑方法消除內源性甘油，這個方法是可行的，但忽視了一個化學平衡理論。因為所有的酯在水溶液中都不是簡單地以酯的形式存在，而是以水解與酯化相平衡的形式存在。在一個平衡體系中，如果去除游離甘油，這個平衡就向生成甘油方向移動，甘油三酯就會重新水解，生成新的甘油，達到新的平衡，因此樣品與R1試劑孵育時間越長，測得甘油三酯值就越低。甘油三酯測定，不僅要去除游離甘油，而且還要克服樣本含量真實性發生的變化，試劑中必須加入甘油激酶，并且延遲時間要標準化。所以，一些試驗項目在消除內源性物質干擾的同時，會帶來樣品含量真實性的變化。