進(jìn)口原裝ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)材料:蛋白質(zhì)樣品
試劑、試劑盒: 裂解液PBSG 250考馬斯亮藍(lán)溶液NaCl SDS上樣緩沖液電泳緩沖液轉(zhuǎn)移緩沖液麗春紅染液封閉液TBSTTBS洗脫抗體緩沖液顯影液定影液抗體化學(xué)發(fā)光試劑
儀器、耗材: 高壓鍋玻璃勻漿器高速離心機(jī)分光光度儀-20℃低溫冰箱垂直板電泳轉(zhuǎn)移裝置恒溫水浴搖床多用脫色搖床
實(shí)驗(yàn)步驟
一、操作步驟:
1. 進(jìn)口原裝ELISA試劑盒蛋白樣品制備
(1) 單層貼壁細(xì)胞總蛋白的提?。?/span>
① 倒掉培養(yǎng)液,并將瓶倒扣在吸水紙上使吸水紙吸干培養(yǎng)液(或?qū)⑵恐绷⒎胖靡粫?huì)兒使殘余培養(yǎng)液流到瓶底然后再用移液器將其吸走)。
② 每瓶細(xì)胞加3ml 4℃預(yù)冷的PBS(0.01 M pH7.2~7.3)。平放輕輕搖動(dòng)1 min 洗滌細(xì)胞,然后棄去洗液。重復(fù)以上操作兩次,共洗細(xì)胞三次以洗去培養(yǎng)液。進(jìn)口原裝ELISA試劑盒將PBS棄凈后把培養(yǎng)瓶置于冰上。