人血吸蟲(chóng)抗體(IgM)ELISA試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到
100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
HUVEC-12, 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系
HUM, 正常人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
HAVSMC, 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
LX-2, 人肝星形細(xì)胞株
3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞
C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞
細(xì)胞名稱
MCF-7(MCF7)(ATCC來(lái)源), 人乳腺癌細(xì)胞
MDA-MB-231(ATCC來(lái)源), 人乳腺癌細(xì)胞
Raji,人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞
Saos-2,人成骨肉瘤細(xì)胞
Caco-2,人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
NCI-N87 [N87]人胃癌細(xì)胞
MGC80-3(MGC-803)人胃癌細(xì)胞
EC109,人食管癌細(xì)胞
HGC-27人胃癌細(xì)胞
AGS人胃腺癌細(xì)胞
U251人膠質(zhì)瘤細(xì)胞
THP-1人單核白血病細(xì)胞
HuH-7人肝癌細(xì)胞
SK-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞
A549, 人肺癌細(xì)胞系
SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株
A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細(xì)胞株
A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細(xì)胞株
SP2/0, 小鼠骨髓瘤細(xì)胞
WM35, 人黑色素瘤細(xì)胞
BxPC-3, 人原位胰腺腺癌細(xì)胞株
U-2 OS, 人骨肉瘤細(xì)胞
WM451, 人黑色素瘤細(xì)胞
SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌細(xì)胞