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產品名稱:波氏桿菌通用PCR檢測試劑盒
規格: 50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
產品名稱14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份
產品特點:
高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
(聚乙二醇8000)
PenicillinGNasalt 5g/25g/100g INALCO原裝
(青霉素G鈉鹽)
Penicillin-Streptomycin 100ml原裝 INVITROGEN
(青霉素-鏈霉素溶液)
PentobarbitalSodium 5g/10g/25g 用于實驗動物
(戊巴比妥鈉鹽)
Pepsin1:10000 5g/25g/100g/1kg原裝 Sigma P7000
(胃蛋白酶1:10000)
Pepsin1:3000 100g/250g/1kg 原裝 Amresco 0685
(胃蛋白酶1:3000
(豬源))
Pepstatin 5mg/25mg原裝/250mg原裝 Amresco J583
(胃蛋白酶抑制劑)
PepstatinA 5mg/10mg CNI分裝
(抑胃肽)
Peptone 500g原裝 OXOID
(蛋白胨)
PeptoneBacto 100g/500g原裝 BD 211677
(蛋白胨)
波氏桿菌通用PCR檢測試劑盒PeptoneBeef 500g 國產
(牛肉蛋白胨)
PeptoneSoy 250g/1kg 國產
(大豆蛋白胨)
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
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