細(xì)胞簡介：

大鼠表皮角質(zhì)形成分離自皮膚組織；表皮位于動物皮膚的外層，由胚胎時期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞是一種能合成角質(zhì)蛋白的上皮細(xì)胞，此類細(xì)胞為表皮的主體，由表皮深層始逐漸增殖、分化，并在成為角化的角質(zhì)細(xì)胞中，細(xì)胞核與細(xì)胞器消失，細(xì)胞亦失去生理功能而脫落。未脫落部分對機體尚有保護作用，故不必在洗擦身體時用力搓擦，使其過早脫失。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞主要分布于表皮基底層，在上皮程序性死亡后，細(xì)胞產(chǎn)生角化并移向表皮。體外培養(yǎng)的表皮角化細(xì)胞容易導(dǎo)致終末分化，不能充分增殖。角質(zhì)形成細(xì)胞終產(chǎn)生角質(zhì)蛋白，在其向角質(zhì)細(xì)胞演變過程中，一般可以分為四層，即基底層、棘層、顆粒層以及角質(zhì)層。有人把前三層或前二層稱為生發(fā)層或馬爾匹基層。此外，在某些部位，特別在掌跖部位，角質(zhì)層下方還可見到透明層。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠表皮角質(zhì)形成經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞傳代步驟：

如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

細(xì)胞凍存步驟:

待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒 ，英文名： β-EP ELISA Kit

Rabbit immunoglobulin E (IgE) ELISA Kit 兔子免疫球蛋白E(IgE)試劑盒

ELISA 小鼠神經(jīng)營養(yǎng)素4(mouse -4)  進口分裝

CLIAKitforIL-12/P40ELISAKit大鼠白介素12

通用型馬鈴薯潛伏毒(RedLaSodaVirus;RLaSV/PotatolateVirus)試劑盒20次

ELISAKitVCAM-1/CD106大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1

總（T-GSH）/氧化型（GSSG）測定試劑盒（微板法）

酸性0酸酶（ACP）測定試劑盒（微板法）

抗酸性0酸酶（SACP）試劑盒（比色法）

過氧化物酶（GSH-PX）測定試劑盒（比色法）

RBMS2蛋白抗體

豬載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA 試劑盒

Human melanocyte aibody (MC Ab) ELISA Kit 人黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)試劑盒

RabbitmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/RLAⅠELISAKit 兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/RLAⅠ)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforApoC3(HumanApolipoproteinC3)ELISAKit人載脂蛋白C3

血清/血漿總膽汁酸酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次

PorcineKeratinocyteGrowthFactor,KGFELISAKit豬角化細(xì)胞生長因子(KGF)試劑盒

細(xì)胞核因子p105/k基因結(jié)合核因子重組兔單克隆抗體

CD40重組小鼠 CD40 / TNFRSF5 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

107kDa肌醇多聚0酸-4-0酸酶Ⅰ型(INPP4A)重組蛋白 Recombinant Inositol Polyphosphate-4-Phosphatase Type I 107kDa (INPP4A)

MAPK14重組人 p38 alpha / MAPK14 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

BTK Protein Human 重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 (His 標(biāo)簽)

VEGFA Protein Rat 重組大鼠 VEGF164 / VEGFA 蛋白

大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞107kDa肌醇多聚0酸-4-0酸酶Ⅰ型(INPP4A)重組蛋白 Recombinant Inositol Polyphosphate-4-Phosphatase Type I 107kDa (INPP4A)

BTK Protein Human 重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD40重組小鼠 CD40 / TNFRSF5 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

VEGFA Protein Rat 重組大鼠 VEGF164 / VEGFA 蛋白

MAPK14重組人 p38 alpha / MAPK14 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein